Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD141/Trombomodulina per IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P07204

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CD141/Trombomodulina

• La trombomodulina (nota anche come Fetomodulina o CD141) è un recettore delle cellule endoteliali che svolge un ruolo critico nella regolazione dell'emostasi, della coagulazione, della fibrinolisi, dell'infiammazione e dell'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:10761923

• Funge da cofattore essenziale per l'attivazione della proteina C (PROC) mediata dalla trombina, avviando la via anticoagulante sulle cellule endoteliali vascolari. Riferimenti correlati: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524

• La trombomodulina accelera l'attivazione della carbossipeptidasi B2 plasmatica (CPB2/TAFI), che inibisce la fibrinolisi rimuovendo gli amminoacidi basici C-terminali da substrati come chinine e anafilotossine. Riferimenti correlati: PMID:26663133

• Sopprime l'infiammazione indipendentemente dalla sua attività anticoagulante sequestrando la molecola pro-infiammatoria HMGB1, impedendone l'interazione con recettori cellulari come RAGE. Riferimenti correlati: PMID:15841214

• La trombomodulina protegge anche l'integrità della barriera endoteliale alterando la specificità di scissione del recettore attivato da proteasi 1 (PAR1), inibendo così la permeabilità delle cellule endoteliali (per similarità).

• A livello subcellulare, la trombomodulina è localizzata principalmente sulla membrana plasmatica, coerentemente con le sue funzioni recettoriali.

• La proteina è espressa prevalentemente nelle cellule endoteliali e subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e idrossilazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 19–515), che contiene tutte le ripetizioni simili all'EGF e il dominio simile alla lectina; questo design probabilmente produce anticorpi che riconoscono epitopi nativi, accessibili in superficie, adatti per la citometria a flusso e l'immunoistochimica.
• Per IHC-P, considerare di testare diversi metodi di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore a pH 6 o 9) e di titolare la concentrazione dell'anticorpo a causa della potenziale variabilità nella fissazione dei tessuti.
• Per IF/ICC, includere passaggi di permeabilizzazione appropriati se si punta a pool intracellulari e validare con un controllo negativo per confermare la colorazione specifica della membrana.
• Nella citometria a flusso, utilizzare un protocollo di colorazione su cellule vive con un anticorpo secondario coniugato con fluoroforo appropriato per ridurre al minimo il legame aspecifico; verificare le prestazioni con una linea cellulare endoteliale positiva nota.
• Per la rilevazione ELISA della trombomodulina solubile nel plasma o nel siero, valutare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione in un formato sandwich, considerando i potenziali effetti di matrice.

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