Anticorpo monoclonale anti-CD144/VE Cadherin per FC - P33151

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Cadherina-5 (CD144/VE-Cadherin)

• La Cadherina-5, nota anche come antigene 7B4 o cadherina endoteliale vascolare (VE-cadherin), è codificata dal gene CDH5 e appartiene alla superfamiglia delle cadherine di proteine di adesione cellulare dipendenti dal calcio.
• Le cadherine mediano preferenzialmente interazioni omofile per collegare cellule adiacenti, contribuendo all'ordinamento di tipi cellulari eterogenei. Riferimenti correlati: PMID:21269602
• Nelle cellule endoteliali, la cadherina-5 svolge un ruolo critico nel controllo della coesione e dell'organizzazione delle giunzioni intercellulari, mantenendo così l'integrità vascolare.
• Si associa all'alfa-catenina, formando un legame fisico con il citoscheletro di actina. Riferimenti correlati: PMID:10861224
• La Cadherina-5 agisce come un'ancora di giunzione per AMOTL2 e MAGI1, accoppiando le fibre di actina alle giunzioni cellulari nelle cellule endoteliali e regolando la polarità delle cellule endoteliali e la formazione del lume vascolare attraverso il complesso di polarità Par e RAP1B. Riferimenti correlati: PMID:20332120
• Regola positivamente il riorientamento delle fibre di stress di actina e il riorientamento delle cellule endoteliali in risposta a forze meccaniche (meccanotrasduzione). Riferimenti correlati: PMID:25795300
• La localizzazione subcellulare include la giunzione cellulare (giunzioni aderenti), la membrana cellulare e il citoplasma, con un traffico dinamico regolato da CTNND1/p120-catenina per controllare l'endocitosi.
• L'espressione tissutale è predominante nelle cellule endoteliali (confermata a livello proteico) e anche nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:27338829, PMID:2059658
• È caratterizzata da splicing alternativo, ripetizioni di legame del calcio, un'elica transmembrana e modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e glicosilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 48–593 della Cadherina-5 umana, che si estende attraverso il dominio extracellulare. Questo design rende l'anticorpo adatto per rilevare il CD144 di superficie cellulare mediante citometria a flusso su cellule vive, non permeabilizzate.
• Dato che la conformazione della cadherina dipende dal calcio, considerare l'inclusione di concentrazioni fisiologiche di calcio (es. 1–2 mM) nei buffer di colorazione e lavaggio per preservare la struttura dell'epitopo nativo.
• Per la citometria a flusso, validare l'anticorpo utilizzando una linea cellulare endoteliale nota positiva come HUVEC o EA.hy926, e utilizzare una linea cellulare CD144-negativa (es. HEK293) come controllo negativo.
• Gli anticorpi monoclonali offrono un'elevata coerenza batch-to-batch; tuttavia, ogni nuovo lotto dovrebbe essere titolato per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il proprio sistema sperimentale specifico.
• Il coniugato è compatibile con comuni linee di laser violetto (eccitazione a 405 nm) e può essere multiplexato con altri fluorofori; eseguire i controlli di compensazione secondo necessità.

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