Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-CD146/MCAM per WB, IHC-P, ELISA - P43121

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD146/MCAM

• Il CD146, noto anche come MUC18, MEL-CAM o S-endo 1, è una molecola di adesione cellulare appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline.
• Contribuisce alla coesione del monostrato endoteliale a livello delle giunzioni intercellulari e può facilitare l'interazione delle cellule di melanoma con gli elementi vascolari, potenziando la metastasi ematogena.
• Agisce come recettore di superficie che innesca segnalazione intracellulare dopo il legame, inclusa la fosforilazione tirosinica di FYN e PTK2/FAK1, e un transiente afflusso di calcio.
• La proteina è una glicoproteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo composta da un peptide segnale, cinque domini simili a Ig, un'elica transmembrana e una regione citoplasmatica.
• Esprime prevalentemente nelle cellule endoteliali vascolari e nella muscolatura liscia; sovraregolato nei melanomi primari avanzati e nelle lesioni metastatiche, ma raramente rilevato nei nevi benigni.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata e fosforilazione tirosinica indotta da stimolo.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• Poiché l'immunogeno (aa 547-646) si trova all'interno del dominio citoplasmatico, si raccomanda la permeabilizzazione per IHC-P e per i formati ELISA in cui la superficie cellulare non è accessibile.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 72 kDa in condizioni riducenti; validare la specificità con controlli positivi (ad es., lisato di HUVEC) e negativi.
• Durante l'esecuzione dell'IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo; considerare l'uso di un sistema di rilevamento basato su polimeri per la sensibilità.
• La reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto offre flessibilità per studi traslazionali; verificare le prestazioni nel tessuto della specie rilevante.
• Per l'ELISA, confermare che l'epitopo sia disponibile nel formato del saggio; il rivestimento diretto dell'antigene potrebbe richiedere denaturazione per esporre la sequenza peptidica.

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