Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD146/MCAM per WB, IHC-P, IF/ICC - P43121

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD146/MCAM

• CD146/MCAM (noto anche come MUC18, MelCAM, HEMCAM) è una glicoproteina di superficie cellulare codificata dal gene MCAM, appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline delle molecole di adesione.
• Media l'adesione cellula-cellula indipendente dal calcio ed è fondamentale per mantenere l'integrità del monostrato endoteliale alle giunzioni intercellulari.
• La sua espressione sulle cellule di melanoma facilita le interazioni con l'endotelio vascolare, promuovendo la disseminazione ematogena e le metastasi.
• Durante lo sviluppo embrionale, CD146/MCAM può funzionare come molecola di adesione nelle cellule della cresta neurale in migrazione.
• Il legame del ligando innesca la fosforilazione tirosinica di FYN e PTK2/FAK1, insieme a un aumento transitorio del calcio intracellulare, indicando un ruolo nella trasduzione del segnale.
• Nei tessuti adulti normali, l'espressione di CD146/MCAM è largamente limitata alle cellule muscolari lisce vascolari e alle cellule endoteliali.
• La proteina è altamente espressa nei melanomi primari avanzati e metastatici ma raramente rilevata nei nevi benigni, correlando con la progressione tumorale.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e glicosilazione N-legata, e la proteina contiene ripetizioni immunoglobuliniche legate da disolfuro e un dominio transmembrana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 24-559) di CD146/MCAM umano, prevedendo il rilevamento della proteina a lunghezza intera e di eventuali forme solubili rilasciate in campioni appropriati.
• Per il Western blot, la banda prevista è ~72 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione, il peso molecolare osservato potrebbe essere più alto. Considerare l'uso di condizioni denaturanti e riducenti.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), la localizzazione di membrana dovrebbe essere prominente; includere un'appropriata permeabilizzazione se si desidera accedere a epitopi intracellulari, sebbene il targeting del dominio extracellulare possa consentire la colorazione di cellule vive.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbero essere necessari metodi di recupero dell'antigene e ottimizzazione; l'espressione è attesa nell'endotelio vascolare e nel tessuto di melanoma.
• Sebbene l'ELISA sia elencato come applicazione, abbinarlo a un anticorpo di cattura/rilevamento adeguato; gli utenti finali dovrebbero validare l'anticorpo nel loro specifico formato di saggio.
• La reattività crociata è stata validata per l'umano; per altre specie, eseguire un'analisi di omologia di sequenza e una verifica sperimentale.

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