Anticorpo policlonale anti-CD152/CTLA-4 per WB, IHC-P, ELISA - P16410

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CTLA-4

• CTLA-4 (proteina 4 dei linfociti T citotossici, nota anche come CD152) è un recettore transmembrana inibitorio e un membro della superfamiglia delle immunoglobuline. Esiste come omodimero legato da ponti disolfuro, mentre lo splicing alternativo genera un'isoforma solubile priva del dominio transmembrana.
• CTLA-4 agisce come principale regolatore negativo delle risposte delle cellule T, funzionando da recettore esca. Compete con il co-recettore stimolatorio CD28 per il legame ai ligandi della famiglia B7, CD80 e CD86, con un'affinità considerevolmente maggiore, attenuando così l'attivazione delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:11279501 PMID:11279502 PMID:16551244
• La proteina è localizzata nella membrana cellulare ed è espressa prevalentemente nei tessuti linfoidi, con i livelli più elevati sulle cellule T attivate. L'espressione sulla superficie delle cellule T attivate è da 30 a 50 volte inferiore rispetto a quella di CD28.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione, che modulano la sua dinamica sulla superficie cellulare e l'attività di segnalazione. Il dominio extracellulare contiene un singolo dominio simile a IgV con un ponte disolfuro conservato.
• CTLA-4 è implicato in malattie autoimmuni come il diabete mellito di tipo 1 e il lupus eritematoso sistemico (LES), e le varianti genetiche sono associate alla predisposizione a questi disturbi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 36-161) del CTLA-4 umano, rendendo questo anticorpo adatto al rilevamento del recettore nativo legato alla membrana. Nella progettazione degli esperimenti, si consiglia di utilizzare lisati di cellule T attivate o tessuti con espressione nota di CTLA-4 come controlli positivi.
• Per il Western blotting (WB), in condizioni riducenti può essere osservata una banda corrispondente a circa 25 kDa (forma monomerica); si noti che la forma omodimerica di circa 50 kDa può essere visibile anche in condizioni non riducenti.
• Nell'immunoistochimica (IHC), il recupero antigenico con tampone citrato (pH 6,0) e la permeabilizzazione possono migliorare il rilevamento. È stato riportato che l'anticorpo reagisce anche con il CTLA-4 di topo e ratto; tuttavia, le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente.
• Per le applicazioni ELISA, si consiglia di abbinarlo a un anticorpo di rilevamento idoneo che riconosca un epitopo non sovrapposto e di validarlo nella matrice campione pertinente.

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