Anticorpo monoclonale biotinilato anti-CD16 per FC - P08637 / O75015

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD16

• CD16 è il recettore a bassa affinità per la regione Fc gamma delle immunoglobuline III-A (FCGR3A), anche designato come CD16a, Fc-gamma RIII-alfa e FcRIIIa.
• Funziona come recettore per il frammento Fc delle IgG, attivato in modo ottimale da complessi antigene-IgG aggregati sulle superfici cellulari per mediare la citotossicità cellulare anticorpo-dipendente (ADCC) senza legare IgG monomeriche libere. Riferimenti correlati: PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369
• Nelle cellule NK, la segnalazione mediata da CD16 coinvolge la fosforilazione di adattatori contenenti ITAM, l'attivazione di PI3K e un prolungato aumento del calcio intracellulare, culminando nel rilascio di citochine pro-infiammatorie e nella degranulazione. Riferimenti correlati: PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305
• CD16 svolge un ruolo chiave nella sopravvivenza, proliferazione delle cellule NK e nella generazione di cellule NK adattative simili a memoria con capacità potenziata di produzione di IFN-γ e ADCC antivirale. Riferimenti correlati: PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693
• Il recettore contribuisce anche all'efficacia antitumorale degli anticorpi monoclonali terapeutici mediando l'ADCC di cellule tumorali opsonizzate con IgG, con un'attività potenziata osservata per anticorpi IgG1 afucosilati. Riferimenti correlati: PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370
• CD16 è espresso principalmente sulla superficie delle cellule NK e di un sottogruppo di monociti circolanti, e può essere trovato anche in una forma secreta. Riferimenti correlati: PMID:2526846 PMID:27670158
• Inoltre, CD16 è implicato nella patogenesi del virus della Dengue tramite potenziamento anticorpo-dipendente, dove anticorpi IgG1 anti-Dengue afucosilati facilitano l'ingresso virale nelle cellule mieloidi.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, formazione di legami disolfuro e fosforilazione, che regolano la funzione e la segnalazione del recettore.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 20-208) del CD16 umano, suggerendo che l'anticorpo riconosca un epitopo in questa regione; verificare la reattività con entrambi gli isoforme FCGR3A (P08637) e FCGR3B (O75015) se necessario.
• Per la citometria a flusso, utilizzare l'etichetta biotina con reagenti secondari streptavidina coniugati a fluoroforo; titrare sia l'anticorpo primario che il coniugato streptavidina per identificare i rapporti segnale-rumore ottimali.
• Includere controlli isotipo appropriati e passaggi di blocco del Fc per minimizzare il legame aspecifico, specialmente quando si analizzano cellule che esprimono recettori Fc come cellule NK e monociti.
• Validare l'anticorpo nel sistema campione rilevante (ad es., cellule mononucleate del sangue periferico umano) e considerare attentamente i protocolli di fissazione/permeabilizzazione in quanto potrebbero influenzare l'accessibilità dell'epitopo.

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