Anticorpo monoclonale coniglio anti-CD16 per WB, ELISA - P08637 / O75015

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD16 (FcγRIIIA)

• Il CD16, codificato dal gene FCGR3A (recettore III-A della regione Fc gamma delle immunoglobuline a bassa affinità), è una glicoproteina transmembrana nota anche come CD16a, FcγRIIIα, FcR-10 e recettore Fc IgG III-2.
• Come recettore chiave per il frammento Fc delle IgG, il CD16 riconosce i complessi immuni antigene-IgG raggruppati e innesca la citotossicità cellulare dipendente da anticorpi (ADCC) nelle cellule natural killer (NK) e nei monociti. Questa funzione è essenziale per l'eliminazione delle cellule bersaglio rivestite da anticorpi durante l'infezione e la sorveglianza tumorale. Riferimenti correlati: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Oltre all'attività citotossica, la segnalazione del CD16 promuove la generazione di cellule NK adattative di tipo memoria che producono alti livelli di IFNG ed esibiscono capacità antivirali e antitumorali potenziate. Riferimenti correlati: PMID:24412922, PMID:25786175
• Il coinvolgimento del CD16 porta alla fosforilazione degli adattatori contenenti ITAM e all'attivazione delle chinasi a valle (es. PI3K) nonché al flusso di calcio intracellulare, regolando sia la produzione di citochine che la degranulazione. Riferimenti correlati: PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• Il recettore si localizza principalmente sulla membrana cellulare delle cellule NK e di un sottoinsieme di monociti circolanti; può anche essere rilasciato in forma solubile.
• Il CD16 è molto rilevante nell'immunoterapia del cancro, in quanto media gli effetti antitumorali degli anticorpi terapeutici e risponde con una opsonizzazione e un'ADCC potenziate alle glicoforme IgG afucosilate. Riferimenti correlati: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Nel contesto dell'infezione da virus Dengue, il CD16 può contribuire al potenziamento dipendente da anticorpi (ADE), in cui i complessi di IgG sub-neutralizzanti facilitano l'ingresso virale nelle cellule mieloidi, aggravando la patogenesi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (proteina ricombinante che copre gli aminoacidi 20–208 del CD16 umano) corrisponde alla regione extracellulare; pertanto ci si aspetta che l'anticorpo riconosca il CD16 nativo espresso sulla superficie. I ricercatori possono considerare l'uso di colorazione su cellule viventi o condizioni non denaturanti per preservare la conformazione nativa.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto del CD16 è di circa 29 kDa (P08637) o 26 kDa (O75015), ma la forma glicosilata matura spesso migra a un peso superiore. Convalidare il pattern di bande osservato nel sistema di campione pertinente e includere appropriati controlli di deglicosilazione se necessario.
• Nell'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Data la sua reattività crociata con il CD16 del mouse, può essere impiegato in sistemi modello xenogeneici, ma gli utenti devono confermare specificità e sensibilità nelle proprie condizioni sperimentali.
• Poiché il CD16 è espresso prevalentemente sulle cellule NK e su un sottoinsieme di monociti, i lisati da cellule NK arricchite (es. cellule selezionate CD56-positivo) o linee cellulari monocitiche (es. THP‑1) sono controlli positivi adatti. Per l'analisi a livello tissutale, considerare che l'espressione del CD16 è relativamente limitata e potrebbe richiedere metodi di rilevamento sensibili.

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