Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-CD16 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08637/O75015

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD16

• CD16a (FCGR3A) è un recettore a bassa affinità per il frammento Fc delle IgG, espresso principalmente sulle cellule natural killer (NK) e su un sottoinsieme di monociti. Svolge un ruolo centrale nella citotossicità cellulare dipendente da anticorpi (ADCC) e nella produzione di citochine. Riferimenti correlati: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369, PMID:27670158
• Dopo il legame con bersagli opsonizzati da IgG, CD16a innesca cascate di segnalazione mediate da ITAM, che portano all'attivazione delle cellule NK, alla degranulazione e alla lisi delle cellule bersaglio. Questo processo è fondamentale per l'immunità antivirale e la sorveglianza tumorale. Riferimenti correlati: PMID:24412922, PMID:25786175, PMID:29967280, PMID:9916693, PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16a può anche costimolare le cellule NK e mediare la lisi delle cellule bersaglio indipendentemente dal legame con le IgG, evidenziando il suo ruolo nell'attivazione immunitaria innata. Riferimenti correlati: PMID:10318937, PMID:23006327
• Il recettore media l'efficacia antitumorale degli anticorpi monoclonali terapeutici, con una maggiore attività osservata dopo il legame con IgG afucosilate. Riferimenti correlati: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Nel contesto dell'infezione da virus Dengue, CD16a favorisce l'aumento dipendente da anticorpi (ADE) legandosi ai complessi IgG1 afucosilate-virus, promuovendo l'ingresso del virus nelle cellule mieloidi.
• Subcellolarmente, CD16a è ancorato alla membrana cellulare tramite un'elica transmembrana e può essere presente anche in forma secreta. Subisce fosforilazione e glicosilazione, che modulano le sue funzioni di segnalazione.
• L'espressione tissutale è limitata alle cellule NK e a un sottoinsieme di monociti, come confermato a livello proteico. Riferimenti correlati: PMID:2526846, PMID:27670158

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare (amminoacidi 20-208) di CD16b umano, il che suggerisce che l'anticorpo riconosca un epitopo conservato tra CD16a e CD16b. Si consiglia di validare direttamente la reattività crociata nel proprio modello sperimentale.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 29 kDa (forma non glicosilata), ma possono comparire macchie di peso molecolare più elevato a causa della forte glicosilazione. L'uso di un agente riducente e l'ottimizzazione della percentuale di gel possono migliorare la risoluzione.
• Nell'IHC-P, è previsto un pattern di colorazione di membrana; includere controlli negativi e positivi appropriati (ad esempio, tessuti ricchi di cellule NK come la milza o la tonsilla).
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per preservare l'epitopo extracellulare; la colorazione su cellule vive può essere adatta anche per CD16 di superficie.
• Le applicazioni ELISA possono trarre vantaggio dall'abbinamento con un anticorpo di rilevamento che bersaglia un epitopo distinto; considerare la potenziale interferenza del legame con IgG afucosilate in determinati formati di saggio.

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