Anticorpo policlonale anti-CD163 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86VB7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD163

• Il CD163, noto anche come proteina M130 ricca di cisteina di tipo 1 del recettore spazzino o recettore spazzino dell'emoglobina, è codificato dal gene CD163 (GeneID: 9332). Appartiene alla superfamiglia dei recettori spazzino ricchi di cisteina.
• La funzione primaria del CD163 è la clearance e l'endocitosi regolata dalla fase acuta dei complessi emoglobina/aptoglobina da parte dei macrofagi, proteggendo così i tessuti dai danni ossidativi causati dall'emoglobina libera.
• Il CD163 svolge un ruolo nel riciclo del ferro attraverso l'assorbimento e la degradazione dell'eme dopo l'endocitosi dei complessi emoglobina/aptoglobina; questo legame dipende dal calcio e dal pH.
• Esibisce un'affinità più elevata per i complessi di emoglobina con aptoglobina multimerica (fenotipo HP*1F) rispetto all'aptoglobina dimerica (fenotipo HP*1S) e innesca una segnalazione intracellulare che coinvolge la mobilizzazione del calcio dipendente dalla tirosin chinasi, la produzione di inositolo trifosfato e la secrezione di IL6 e CSF1.
• Esistono tre isoforme dovute allo splicing alternativo; l'isoforma 3 è la forma predominante nel sangue e mostra una capacità maggiore di endocitosi del ligando e di espressione di superficie.
• La proteina è localizzata alla membrana cellulare e può anche essere secreta in forma solubile (sCD163) dopo lo shedding, che può avere effetti antinfiammatori e servire come marcatore diagnostico per l'attivazione dei macrofagi.
• L'espressione specifica del tessuto è osservata nei monociti e nei macrofagi tissutali maturi, inclusi le cellule di Kupffer (fegato), i macrofagi della polpa rossa (milza), i macrofagi corticali (timo), i macrofagi residenti del midollo osseo e i macrofagi meningei del SNC.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione; la proteina contiene un peptide segnale, un'elica transmembrana e ripetizioni SCR multiple contenenti legami disolfuro.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide del CD163 umano (aa 750–1050), che è conservato nell'uomo, nel topo e nel ratto. La reattività crociata deve essere validata nel sistema di campioni della specie pertinente.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 125 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti o non riducenti in base all'accessibilità dell'epitopo.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), il CD163 è un marcatore classico dei macrofagi M2 e può essere utilizzato per colorare tessuti come fegato, milza o sezioni tumorali. Includere appropriati controlli positivi ricchi di macrofagi.
• Per IF/ICC, possono essere osservati pattern di colorazione di membrana e potenzialmente intracellulari a seconda del tipo cellulare e dello stato di attivazione.
• Quando si sviluppa un ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di cattura per migliorare la specificità e validare il saggio in matrici biologiche pertinenti come siero o supernatante di coltura cellulare.
• La forma solubile shed (sCD163) può essere presente nei campioni; progettare esperimenti per distinguere il CD163 legato alla membrana da quello solubile se necessario.

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