Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-CD163 per WB, IF-P, ELISA - Q86VB7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD163 (M130)

• CD163 (conosciuto anche come proteina M130 del recettore depuratore ricco di cisteina di tipo 1, M130, MM130, SCARI1) è un recettore regolato nella fase acuta coinvolto principalmente nella clearance dei complessi emoglobina/aptoglobina da parte dei macrofagi, che protegge i tessuti dal danno ossidativo.
• Lega i complessi emoglobina/aptoglobina in modo dipendente dal calcio e dal pH, innescando l'endocitosi e la successiva degradazione dell'eme per il riciclo del ferro, inducendo inoltre cascate di segnalazione intracellulare che promuovono la secrezione di citochine (ad esempio IL6, CSF1).
• L'isoforma 3 (l'isoforma predominante nel sangue) presenta una capacità endocitica e un'espressione di superficie maggiori rispetto alle altre isoforme.
• La forma solubile (sCD163), generata per distacco, agisce come mediatore antinfiammatorio e viene utilizzata come parametro diagnostico per monitorare l'attivazione dei macrofagi in condizioni infiammatorie.
• CD163 si localizza sia sulla membrana cellulare dei monociti e dei macrofagi tissutali maturi (ad esempio cellule di Kupffer, macrofagi della polpa rossa splenica) sia in forma secreta.
• Contiene un peptide segnale, più domini del recettore depuratore ricchi di cisteina (SRCR), una regione transmembrana ed è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro.
• È espresso in elevate quantità nelle cellule di Kupffer epatiche, nei macrofagi della polpa rossa splenica, nei macrofagi corticali timici, nei macrofagi residenti nel midollo osseo e nei macrofagi meningei.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blot (WB), tenere conto del peso molecolare previsto di ~125 kDa; regolare di conseguenza la percentuale di gel e il tempo di trasferimento per garantire un blottaggio efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni di paraffina (IF-P), le condizioni di recupero dell'antigene possono influenzare l'accessibilità all'epitopo; ottimizzare il recupero dell'epitopo indotto da calore (HIER) o i metodi enzimatici in base al tipo di tessuto in esame.
• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre il dominio citoplasmatico (aa 861–961), che può dare buone prestazioni nella rilevazione di proteine totali; tuttavia, per l'ELISA sandwich, testare la compatibilità di accoppiamento con anticorpi che bersagliano epitopi distinti.
• Poiché la reattività crociata è limitata all'uomo, validare la specificità del test utilizzando linee cellulari o campioni di tessuto umani appropriati e considerare controlli isotipici per esperimenti multiplex.

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