Anticorpo policlonale di coniglio Anti-CD171/L1CAM per WB, IF/ICC, ELISA - P32004

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD171/L1CAM

• La molecola di adesione cellule neurali L1 (L1CAM, designata anche come CD171) è una molecola di adesione cellule della superfamiglia delle immunoglobuline che esiste in più isoforme tramite splicing alternativo.
• Media le dinamiche di adesione cellulare e genera segnali transmembrana presso i recettori tirosin-chinasi, svolgendo ruoli essenziali nello sviluppo e nella funzione del sistema nervoso.
• Durante lo sviluppo cerebrale, L1CAM è fondamentale per la migrazione neuronale, la crescita assonale e la fascicolazione, e la sinaptogenesi; nel cervello adulto contribuisce alla plasticità sinaptica e alle dinamiche strutturali.
• L1CAM si localizza sulla membrana plasmatica ed è arricchito nelle proiezioni neuronali specializzate, inclusi i coni di crescita, gli assoni e i dendriti.
• La proteina è una glicofosfoproteina con domini simili alle immunoglobuline e legami disolfuro; la sua fosforilazione regola le funzioni adesive e di segnalazione.
• Le mutazioni nel gene L1CAM sono associate a un ampio spettro di disturbi neurologici, tra cui idrocefalo legato all'X, sindrome MASA, paraplegia spastica di tipo 1 e agenesia del corpo calloso.
• È espresso principalmente nel sistema nervoso ed è stato implicato nella migrazione e differenziazione cellulare anche in contesti non neuronali.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'immunogeno bersaglia la regione C-terminale intracellulare (amminoacidi 1143-1257) di L1CAM, conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta la reattività crociata osservata. Non si prevede che questa regione sia glicosilata, quindi l'anticorpo può riconoscere sia le forme glicosilate che quelle non glicosilate.
• Western blotting: Il peso molecolare previsto è 140 kDa, ma un'estesa glicosilazione sposta tipicamente la banda apparente a ~200-220 kDa. Si consigliano condizioni riducenti e denaturanti, e la validazione con lisati di cervello o cellule neuronali.
• Immunofluorescenza/ICC: La permeabilizzazione è necessaria per rilevare l'epitopo intracellulare. Si consigliano fissazione con PFA al 4% e permeabilizzazione con 0,1% Triton X-100. Eseguire una colorazione simultanea con marcatori neuronali per confermare la specificità nei neuroni e nelle proiezioni.
• ELISA: L'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rivelazione in formati ELISA diretti o indiretti. Per ELISA sandwich, abbinarlo a un anticorpo di cattura che bersagli un epitopo distinto. La titolazione e l'ottimizzazione sono essenziali.

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