Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD177 per FC, ELISA - Q8N6Q3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD177

• CD177, noto anche come antigene allogenico 2a dei neutrofili umani (HNA-2a), glicoproteina NB1 (NB1 GP) e proteina 1 della policitemia vera (PRV-1), è una glicoproteina ancorata al GPI espressa principalmente sui neutrofili.
• In complesso con le integrine beta-2 (ITGAM/CD11b e ITGB2/CD18), CD177 media l'attivazione dei neutrofili stimolata dal TNF, inclusi la degranulazione e la produzione di superossido. Riferimenti correlati: PMID:21193407
• CD177 modula il traffico dei neutrofili impedendo l'internalizzazione delle integrine beta-2 e attenuando la segnalazione delle chemochine, favorendo così l'adesione rispetto alla migrazione. Riferimenti correlati: PMID:28807980
• Attraverso l'interazione eterofilica con PECAM1 sulle cellule endoteliali, CD177 contribuisce alla migrazione transendoteliale dei neutrofili in vitro, sebbene gli studi in vivo suggeriscano che sia dispensabile per il reclutamento indotto da un'infezione batterica. Riferimenti correlati: PMID:17580308 PMID:23461681
• CD177 funge da recettore di membrana per la proteasi matura PRTN3, consentendone l'esposizione sulla superficie dei neutrofili e potenzialmente favorendo l'integrità delle giunzioni endoteliali durante la diapedesi. Riferimenti correlati: PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:23202369
• A livello subcellulare, CD177 si localizza alla membrana cellulare, nelle zattere di membrana, nelle membrane dei granuli citoplasmatici e nelle lamellipodie; può inoltre esistere in forma secreta.
• L'espressione tissutale è altamente specifica della linea neutrofila, inizia allo stadio di metamielocita ed è presente in una sottopopolazione di neutrofili maturi con una percentuale variabile tra gli individui; è sovraespressa nei granulociti dei pazienti affetti da policitemia vera e trombocitemia essenziale. Riferimenti correlati: PMID:10753836 PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:24926686 PMID:12377969 PMID:12675722 PMID:17580308 PMID:21193407 PMID:27227454 PMID:28240246 PMID:28807980

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 22–407 del CD177 umano (NP_065139.2), coprendo quasi l'intero dominio extracellulare; pertanto, è probabile che l'anticorpo sia adatto per rilevare il CD177 nativo sulla superficie cellulare mediante citometria a flusso (FC) ed ELISA.
• Per le applicazioni di citometria a flusso, si consiglia di utilizzare una popolazione arricchita di neutrofili o campioni di sangue intero di donatori sani, tenendo presente che l'espressione di CD177 è limitata a un sottogruppo di neutrofili maturi e può variare tra gli individui.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; si raccomanda un'ottimizzazione empirica delle concentrazioni di lavoro e delle condizioni del tampone.
• Considerato il suo ruolo nell'attivazione dei neutrofili stimolata dal TNF, l'anticorpo potrebbe essere impiegato per studiare l'espressione e la funzione di CD177 in contesti infiammatori, ma è essenziale la validazione nel sistema di campioni pertinente.
• Poiché la proteina esiste in più isoforme (pesi molecolari previsti di circa 46 kDa per la forma a lunghezza intera, con possibili forme da 27 kDa e 15 kDa), confermare le dimensioni delle bande rilevate nel proprio sistema sperimentale.

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