Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD18 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05107

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD18

• CD18 (integrina beta-2, ITGB2) è una glicoproteina transmembrana di tipo I che si associa a diverse subunità α (CD11a, CD11b, CD11c, CD11d) per formare integrine eterodimeriche: LFA-1 (αLβ2), Mac-1 (αMβ2), p150,95 (αXβ2) e αDβ2 (αDβ2).
• Queste integrine mediano l'adesione e la transmigrazione dei leucociti legandosi alle ICAM (1-3), a VCAM1, al complemento iC3b, al fibrinogeno e al fattore X, processi fondamentali per il traffico delle cellule immunitarie e le funzioni effettrici (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:38195629, PubMed:29100055, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Riferimenti correlati: PMID:1676048, PMID:23775590, PMID:38195629, PMID:29100055, PMID:10438935, PMID:8777714, PMID:9841932, PMID:11812992, PMID:28807980, PMID:18587400
• In qualità di recettore chiave per la rimozione delle cellule apoptotiche, LFA-1 (αLβ2) coopera con ICAM3 per promuovere la fagocitosi dei neutrofili apoptotici da parte dei macrofagi (PubMed:23775590). Inoltre, αXβ2 riconosce ICAM4 eritrocitaria e ICAM5 neuronale, collegando le integrine all'eritrofagocitosi e alle interazioni neurone-leucocita (PubMed:16985175, PubMed:10741396). Riferimenti correlati: PMID:23775590, PMID:16985175, PMID:10741396
• Le integrine CD18 contribuiscono alla citotossicità delle cellule natural killer (PubMed:15356110). Mac-1 (αMβ2) è necessaria per l'attivazione dei neutrofili primati con TNF mediata da CD177‑PRTN3 (PubMed:21193407). Riferimenti correlati: PMID:15356110, PMID:21193407
• A livello subcellulare, CD18 è localizzata sulla membrana cellulare e nei rafts di membrana dei leucociti, in particolare dei neutrofili (PubMed:23775590, PubMed:21193407, PubMed:28807980). Riferimenti correlati: PMID:23775590, PMID:21193407, PMID:28807980
• La proteina è fortemente glicosilata, contiene domini simili all'EGF e presenta motivi di legame per calcio/magnesio essenziali per l'attivazione delle integrine. Subisce modifiche post-traduzionali mediante fosforilazione e presenta un acido pirrolidone carbossilico al suo N-terminale.
• Coerentemente con il suo ruolo essenziale nell'adesione leucocitaria, le mutazioni di ITGB2 sono associate a immunodeficienze quali la carenza di adesione leucocitaria (LAD) di tipo I.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde all'N-terminale (aa 1–100) del CD18 umano; verificare la reattività nella specie/applicazione prevista utilizzando lisati di controllo positivo (ad es. leucociti umani, murini o di ratto).
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda predominante a ~85 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti e la rivelazione con anticorpi secondari appropriati.
• Per l'immunofluorescenza su paraffina (IF-P) e l'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero antigenico (è comunemente richiesto il recupero epitopico indotto dal calore) e titolare l'anticorpo primario per ridurre il background.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o con complessi integrinici nativi; associare un anticorpo secondario di rivelazione per stabilire una curva standard.
• A causa della reattività crociata con topo e ratto, validare la specificità dell'anticorpo nei relativi sistemi modello quando si passa da una specie all'altra.

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