Anticorpo monoclonale coniglio Anti-CD20 per WB e IHC-P - P11836

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD20

• Proteina di membrana specifica dei linfociti B che svolge un ruolo nella regolazione dell'afflusso di calcio cellulare necessario per lo sviluppo, la differenziazione e l'attivazione dei linfociti B. Riferimenti correlati: PMID:12920111, PMID:3925015, PMID:7684739
• Funziona come componente di un canale del calcio operato dal deposito (SOC) promuovendo l'afflusso di calcio dopo l'attivazione da parte del recettore delle cellule B/BCR. Riferimenti correlati: PMID:12920111, PMID:18474602, PMID:7684739
• Localizzato sulla membrana cellulare, con espressione specifica delle cellule B.
• Contiene chiave modificazioni post-traduzionali tra cui palmitoilazione, fosforilazione e un legame disolfuro; è anche classificato come lipoproteina.
• Un bersaglio farmaceutico ben consolidato per le terapie di deplezione delle cellule B, evidenziato dalla sua inclusione nella parola chiave farmaceutica UniProt.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme della proteina.
• L'isoforma canonica ha un peso molecolare di circa 33 kDa (massa annotata UniProt: 33.077 Da).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è un peptide sintetico che mappa gli amminoacidi 100-200 del CD20 umano, una regione che può includere epitopi extracellulari adatti per riconoscere l'antigene di superficie nativo.
• Per il western blot (WB), si prevede una banda vicino a 33 kDa nei lisati di cellule B; considerare l'esecuzione di appropriati controlli positivi (ad es. linee cellulari Raji o Daudi) e la convalida con modelli siRNA o knockout.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), la colorazione del CD20 è prevista essere localizzata sulla membrana nelle zone delle cellule B dei tessuti linfoidei (ad es. tonsilla, linfonodo); ottimizzare il recupero dell'antigene e la titolazione dell'anticorpo per sezioni incluse in paraffina e fissate in formalina.
• Per la citometria a flusso (FC) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), testare su linee cellulari B o PBMC primari; confermare la specificità utilizzando controlli isotipici e verificare la reattività crociata con la scimmia cynomolgus come indicato.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento adatto; considerare l'esecuzione di titolazioni a scacchiera e l'affrontamento di potenziali effetti matrice da campioni di siero o plasma.

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