Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD24 per WB, IF, FC, ELISA - P24807

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD24

• CD24, noto anche come antigene termostabile (HSA), nectadrina e antigene linfocitario 52 (Ly-52), è una proteina trasduttrice del segnale espressa sulle cellule linfoidi, mieloidi ed eritroidi.
• Svolge ruoli fondamentali nella differenziazione cellulare, in particolare nello sviluppo precoce dei timociti, e modula le risposte di attivazione delle cellule B.
• In associazione con SIGLEC10, CD24 sopprime selettivamente le risposte immunitarie ai pattern molecolari associati al danno (DAMP), come HMGB1, HSP70 e HSP90. Riferimenti correlati: PMID:19264983
• CD24 è coinvolto nel controllo dell'autoimmunità. Riferimenti correlati: PMID:20200274
• La proteina è ancorata alla membrana cellulare tramite un'ancora GPI e presenta un peptide segnale; il polipeptide maturo ha un peso di circa 8 kDa (7,8 kDa calcolati in base alla sequenza).
• CD24 è una glicoproteina coinvolta nell'immunità innata e la sua struttura ancorata al GPI facilita la trasduzione del segnale attraverso il rilascio di secondi messaggeri.
• È altamente espresso sulle cellule ematopoietiche, in linea con il suo ruolo nella regolazione immunitaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, CD24 ha un peso molecolare previsto di circa 8 kDa; utilizzare gel ad alta percentuale (ad esempio, SDS-PAGE al 15%) e marcatori di peso molecolare a basso intervallo per una rilevazione accurata.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P), CD24 si localizza sulla membrana cellulare; la diluizione dell'anticorpo primario e le condizioni di permeabilizzazione devono essere ottimizzate in base al tipo di campione.
• Per la citometria a flusso, utilizzare un anticorpo secondario anti-IgG di coniglio e garantire una corretta colorazione della superficie cellulare utilizzando cellule vive e non fissate, così da preservare gli epitopi ancorati al GPI.
• Per l'ELISA, la sequenza dell'immunogeno (amminoacidi 27–53) corrisponde al dominio extracellulare N-terminale del CD24 maturo; considerare l'utilizzo di CD24 ricombinante come controllo positivo.
• Poiché questo anticorpo è monoclonale di coniglio e ha come bersaglio il CD24 di topo, utilizzare anticorpi secondari compatibili con la specie per evitare la reattività crociata con le immunoglobuline endogene di topo nei tessuti o nei campioni cellulari di topo.
• Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli appropriati, come linee cellulari knockout per CD24 o peptidi bloccanti, soprattutto nell'interpretazione dei risultati ottenuti da lisati di tessuti complessi.

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