Anticorpo policlonale coniglio anti-CD25 - P01589

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD25

• Il CD25 (noto anche come p55, catena alfa del recettore dell'IL-2, antigene TAC) è la subunità alfa del recettore ad alta affinità per l'interleuchina-2, codificato dal gene IL2RA.
• Il recettore lega l'interleuchina-2 (IL-2) ed è fondamentale per la regolazione della tolleranza immunitaria modulando l'attività delle cellule T regolatorie (TREG), che sopprimono l'attivazione e l'espansione delle cellule T autoreattive.
• Il CD25 è una glicoproteina transmembrana che contiene domini extracellulari Sushi (CCP) e una breve coda citoplasmatica. Appartiene alla famiglia dei recettori delle citochine di tipo I.
• È localizzato principalmente sulla membrana plasmatica delle cellule T attivate, ma può essere trovato anche sulle cellule T regolatorie e su altre cellule immunitarie, dove partecipa alla trasduzione del segnale dopo il legame dell'IL-2.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali, tra cui glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, che sono importanti per la sua stabilità strutturale e la funzione del recettore.
• Le mutazioni in IL2RA sono associate all'immunodeficienza 41 (IMD41) e alla suscettibilità al diabete mellito di tipo 1 (IDDM10), evidenziando il suo ruolo essenziale nell'omeostasi immunitaria.
• Il CD25 è ampiamente utilizzato come marcatore per le cellule Treg negli studi immunologici ed è un bersaglio per anticorpi terapeutici nelle malattie autoimmuni e nel rigetto del trapianto.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno degli amminoacidi 101-200, che fa parte del dominio extracellulare; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca la forma matura, espressa in superficie, del CD25.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 31 kDa, ma la glicosilazione può causare la comparsa di bande a pesi molecolari superiori. Considerare l'uso di controlli positivi appropriati (es. lisati di cellule T attivate).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF-P), le sezioni incluse in paraffina potrebbero richiedere il recupero dell'antigene; testare in campioni di tessuto rilevanti noti per esprimere il CD25, come i tessuti linfoidi.
• Nella citometria a flusso (FC), l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare il CD25 legato alla membrana sulle cellule vive; assicurarsi di utilizzare controlli di isotipo appropriati e di eseguire la titolazione.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto, ma l'intensità del segnale può variare; validare l'anticorpo nel proprio specifico sistema modello.
• Per le applicazioni ELISA, la natura policlonale può fornire una sensibilità migliorata; ottimizzare le condizioni di rivestimento e di rilevamento.

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