Anticorpo Monoclonale Anti-CD27 per WB, IF-P, ELISA - P26842

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD27

• CD27 è un recettore costimolatorio immune-checkpoint appartenente alla superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale (TNFRSF7), espresso sulla superficie delle cellule T, delle cellule NK e delle cellule B. Riferimenti correlati: PMID:28011863
• Legandosi al suo ligando CD70, CD27 attiva l'asse di segnalazione TRAF2-PTPN6 che inibisce la fosforilazione di LCK, promuovendo la formazione della memoria delle cellule T e l'adattamento trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:38354704
• La via CD70-CD27 è essenziale per l'attivazione e l'espansione delle cellule T antigene-specifiche, garantendo la sorveglianza immunitaria delle cellule B. Riferimenti correlati: PMID:28011863
• CD27 fornisce una segnalazione di feedback negativo durante la differenziazione dei leucociti, modulando l'ematopoiesi nell'attivazione immunitaria.
• Nel tessuto adiposo, CD27 regola negativamente la funzione dei linfociti Th2, influenzando potenzialmente l'infiammazione metabolica.
• Subcellularmente, CD27 si localizza sulla membrana cellulare come proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali, inclusa N-glicosilazione e fosforilazione, e contiene tre ponti disolfuro intramolecolari che stabilizzano il suo dominio extracellulare.
• UniProt annota CD27 con parole chiave come recettore, peptide segnale, elica transmembrana, ponte disolfuro, glicoproteina, fosfoproteina, apoptosi e variante di malattia; si trova prevalentemente nella maggior parte dei linfociti T.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1–100 del CD27 umano, mirando al dominio extracellulare N-terminale, che è esposto sulla superficie cellulare e coinvolto nel legame del ligando. Questo design probabilmente genera anticorpi che riconoscono il CD27 nativo espresso in superficie.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di CD27 è di circa 29 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione, può migrare come una banda diffusa tra 30–55 kDa. Validare utilizzando un lisato di controllo positivo, come Jurkat o altre linee cellulari T.
• Questo anticorpo è stato testato per WB, IF-P ed ELISA con le specie umana e di ratto. Per l'immunofluorescenza (IF-P), è necessaria la permeabilizzazione per rilevare epitopi intracellulari o per verificare la colorazione di superficie. Includere sempre controlli negativi appropriati.
• CD27 può essere rilasciato dalla superficie cellulare dopo l'attivazione, generando CD27 solubile (sCD27). Se si rileva sCD27 mediante ELISA o altri metodi, considerare l'uso di surnatanti di coltura cellulare o campioni di siero.
• Per garantire prestazioni ottimali, conservare l'anticorpo a -20°C in aliquote di lavoro per evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento. La spedizione su sacche di ghiaccio indica che l'anticorpo è stabile in condizioni di trasporto a freddo.

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