Anticorpo policlonale anti-CD27 per WB, ELISA - P26842

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD27

• L'antigene CD27 (alias: T14, TNFRSF7, Tp55) è un membro della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale, funzionando come recettore di checkpoint immunitario costimolatorio sulla superficie delle cellule T, delle cellule NK e delle cellule B.
• Il suo ligando principale è CD70 (CD27L), e la via CD70-CD27 guida l'attivazione e l'espansione delle cellule T specifiche per l'antigene, fornendo la sorveglianza immunitaria delle cellule B. Riferimenti correlati: PMID:28011863
• A livello meccanicistico, il legame di CD70 attiva l'asse TRAF2-PTPN6, inibendo la fosforilazione LCK per promuovere adattamenti della memoria delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:38354704
• Inoltre, il coinvolgimento del CD27 sulle cellule progenitrici precoci invia un segnale di feedback negativo alla differenziazione dei leucociti, modulando l'ematopoiesi, e regola negativamente la funzione dei linfociti Th2 nel tessuto adiposo.
• La proteina è un recettore transmembrana a passaggio singolo localizzato esclusivamente alla membrana cellulare e contiene un peptide segnale, domini ricchi di cisteina extracellulari simili al TNFR, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-legata e la fosforilazione; il recettore è caratterizzato anche da legami disolfuro che stabilizzano la sua struttura extracellulare.
• Il CD27 è ampiamente espresso sulla maggior parte dei T-linfociti e la sua segnalazione è implicata nell'apoptosi, nelle varianti di malattia delle sindromi linfoproliferative e nella regolazione ematopoietica.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 20–191) del CD27 umano, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce epitopi all'interno della regione di legame del ligando; considerare l'esecuzione del mapping dell'epitopo se sono necessarie informazioni precise sul sito di legame.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è 29 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione, la banda osservata potrebbe migrare a un peso molecolare apparente superiore. Validare in condizioni riducenti e non riducenti come appropriato.
• Si riporta che l'anticorpo presenta reattività crociata con il CD27 del mouse, rendendolo uno strumento potenziale per studi comparativi; verificare sempre la reattività crociata nel sistema sperimentale pertinente.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di rilevamento in formato sandwich; ottimizzare empiricamente le condizioni di rivestimento e rilevamento.
• Come preparazione policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata negli saggi quantitativi; considerare l'utilizzo di un anticorpo monoclonale ricombinante se è richiesta una riproducibilità rigorosa.

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