Anticorpo monoclonale anti-CD272/BTLA per FC - Q7TSA3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD272/BTLA

• Il co-inibitore dei linfociti B e T (BTLA; CD272) è un recettore inibitorio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Contiene un peptide segnale, un dominio Ig extracellulare, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica con motivi ITIM e ITSM.
• In seguito al legame con il ligando, BTLA recluta le tirosina fosfatasi SHP-1 (PTPN6) e SHP-2 (PTPN11) per regolare negativamente la segnalazione del recettore antigenico nei linfociti.
  Riferimenti correlati: PMID:12796776, PMID:14652006
• BTLA interagisce con TNFRSF14 (mediatore dell'ingresso dell'herpesvirus, HVEM) in configurazioni cis (sulla stessa cellula) e trans (tra cellule). Le interazioni cis inibiscono la segnalazione trans nei linfociti T naïve, mantenendo uno stato di riposo, mentre le interazioni trans forniscono segnali di sopravvivenza ai linfociti T effettori durante le risposte immunitarie adattative.
  Riferimenti correlati: PMID:19915044
• BTLA è espresso principalmente negli organi linfoidi, comprese le cellule T e B spleniche, i linfonodi, i macrofagi, le cellule NK e le cellule dendritiche, mentre la sua espressione nei tessuti somatici è molto debole. Tra i diversi ceppi murini si osserva una distribuzione tissutale polimorfica.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali quali glicosilazione e fosforilazione e presenta un legame disolfuro che stabilizza la struttura del suo dominio immunoglobulinico.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme di BTLA, che possono modulare la sua espressione superficiale o le interazioni con i ligandi.
• Poiché BTLA funge da recettore co-inibitorio, rappresenta un potenziale bersaglio per l'immunoterapia oncologica e la ricerca sulle malattie autoimmuni.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 30–176), pertanto è probabile che questo anticorpo riconosca la forma nativa di CD272/BTLA murino presente sulla superficie cellulare.
• Ottimizzare la colorazione con una serie di titolazioni (ad es. 0,1–5 µg/mL) in base al tipo specifico di campione; includere un controllo isotipico appropriato.
• Eseguire la citometria a flusso su splenociti murini appena isolati o adeguatamente crioconservati, cellule dei linfonodi o linee cellulari coltivate, per preservare l'espressione superficiale.
• Per la rilevazione diretta non è necessario alcun anticorpo secondario; ridurre al minimo l'esposizione alla luce durante la manipolazione per preservare il fluoroforo .
• Se si valutano applicazioni oltre la FC, convalidare accuratamente il metodo utilizzando controlli positivi e negativi nelle condizioni selezionate.

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