Anticorpo policlonale coniglio Anti-CD274 per WB ed ELISA - Q9EP73

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CD274

• La CD274 (PD-L1/B7-H1) è una proteina transmembrana di tipo I della superfamiglia delle immunoglobuline, codificata dal gene Cd274 nel topo (alias: B7h1, Pdcd1l1, Pdcd1lg1, Pdl1).
• Agisce come ligando per il recettore inibitorio PD-1 (PDCD1), svolgendo un ruolo critico nel mantenimento della tolleranza immunitaria modulando l'attivazione delle cellule T e limitando le risposte effettrici (PubMed:11238124). Riferimenti correlati: PMID:11238124
• Può co-stimolare sottopopolazioni di cellule T che producono principalmente interleuchina-10 (IL10) attraverso un recettore attivante non ancora identificato (PubMed:11015443, PubMed:12719480). Riferimenti correlati: PMID:11015443, PMID:12719480
• La via PDCD1/PD-L1 è sfruttata dai tumori per attenuare l'immunità anti-tumorale; l'interazione con PD-1 inibisce la funzione effettrice dei linfociti T citotossici (CTL) e il blocco di questa via inverte l'esaurimento delle cellule T, fornendo una base razionale per l'immunoterapia del cancro (PubMed:12218188, PubMed:27281199). Riferimenti correlati: PMID:12218188, PMID:27281199
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, la membrana dell'endosoma precoce e la membrana dell'endosoma di riciclo.
• Altamente espresso nel cuore, timo, muscolo scheletrico e polmone; debolmente nel rene, milza, tiroide e fegato. Espresso su cellule dendritiche attivate, cellule B, macrofagi e numerose linee cellulari tumorali linfoidi.
• Le caratteristiche strutturali includono domini simili a immunoglobuline, un legame disolfuro e glicosilazione; possiede anche un peptide segnale, un'elica transmembrana e siti di ubiquitinazione (parole chiave UniProt).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 19-239) della CD274 murina, coprendo la regione responsabile dell'interazione con PD-1; questa progettazione può favorire il rilevamento delle forme di superficie e solubili della proteina nei campioni murini.
• Per il Western blotting, considerare l'utilizzo di condizioni SDS-PAGE riducenti; il peso molecolare previsto non modificato è di circa 33 kDa, ma la glicosilazione spesso risulta in un peso molecolare apparente più elevato (tipicamente 40–50 kDa). Includere controlli appropriati per confermare l'identità della banda.
• Quando si esegue un ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali; validare le prestazioni utilizzando la proteina CD274 ricombinante o cellule che esprimono CD274 per stabilire sensibilità e specificità.
• Sebbene sia indicata la reattività crociata con umano e ratto, verificare le caratteristiche di legame nel contesto sperimentale specifico, poiché l'accessibilità dell'epitopo può variare tra le specie e i tipi di campione.

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