Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD275 per WB - O75144

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del ligando ICOS

• Il ligando ICOS (ICOSL), noto anche come omologo 2 di B7 (B7-H2), proteina Gl50 simile a B7 e proteina 1 correlata a B7 (B7RP-1), è un membro della famiglia B7 di molecole immunitarie costimolatorie.
• Funziona come ligando per il recettore ICOS specifico delle cellule T, fornendo un segnale costimolatorio per la proliferazione delle cellule T e la secrezione di citochine (PubMed:11007762, PubMed:11023515). Riferimenti correlati: PMID:11007762 PMID:11023515
• ICOSL induce inoltre la proliferazione delle cellule B e la loro differenziazione in plasmacellule, evidenziando il suo ruolo nell'immunità umorale.
• Nelle cellule endoteliali, ICOSL è necessario per la corretta transmigrazione dei neutrofili in risposta a chemoattrattanti quali CXCL8/IL-8 o peptidi N-formil-metionilici (fMLP) (PubMed:30498080). Riferimenti correlati: PMID:30498080
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare, in accordo con la sua funzione di ligando transmembrana.
• ICOSL è espresso sulle cellule B del sangue periferico, sui monociti e sulle cellule dendritiche derivate dai monociti; è inoltre ampiamente distribuito nei tessuti, tra cui cervello, cuore, reni, fegato, polmoni e organi linfoidi.
• Strutturalmente, contiene un dominio immunoglobulinico, un legame disolfuro, un peptide segnale, un'elica transmembrana ed è soggetto a glicosilazione N-linked.
• Lo splicing alternativo determina molteplici varianti trascrizionali, modulandone potenzialmente l'espressione e la funzione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (amminoacidi 19-256) di ICOSL umano (NP_056074.1), comprendente il dominio simile a quello delle immunoglobuline. Questo design favorisce il riconoscimento della proteina nativa nel Western blot.
• Per il WB, è prevista una banda intorno a 33 kDa, sebbene modifiche post-traduzionali come la glicosilazione possano spostare il peso molecolare apparente. Si consiglia di prendere in considerazione saggi di deglicosilazione per confermare la specificità.
• Poiché l'anticorpo presenta reattività crociata con ICOSL murino, è adatto per studi comparativi tra campioni umani e murini. Validare le prestazioni nel tessuto o nella linea cellulare pertinente, ad esempio cellule B attivate o monociti.
• Essendo un anticorpo policlonale, è necessario verificare la coerenza tra i diversi lotti e si raccomanda l'uso di controlli positivi e negativi appropriati.
• Per ottenere risultati ottimali, determinare empiricamente la diluizione ideale, iniziando con un intervallo, ad esempio 1:500–1:2000, in base alle raccomandazioni del fornitore e alle condizioni sperimentali.

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