Anticorpo monoclonale anti-CD3 epsilon per WB, IF-P, IHC-P, FC, ELISA - P07766

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD3 epsilon

• CD3E è la catena epsilon della glicoproteina di superficie delle cellule T CD3, nota anche come T3E, TCRE, IMD18 o CD3epsilon.
• È un componente del complesso TCR-CD3 sui linfociti T e svolge un ruolo essenziale nell'immunità adattativa. Riferimenti correlati: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• In seguito all'interazione del TCR con le cellule presentanti l'antigene, le catene CD3 trasmettono segnali attraverso la membrana mediante la fosforilazione degli ITAM da parte di LCK e FYN, portando al reclutamento di ZAP70 e alla segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325
• La fosforilazione degli ITAM di CD3E crea siti di aggancio per la chinasi ZAP70, convertendola in un enzima attivo.
• CD3E è fondamentale per il corretto sviluppo delle cellule T.
• Media l'internalizzazione e la down-regulation dei complessi TCR-CD3 tramite endocitosi, attraverso sequenze di endocitosi presenti nella sua regione citosolica. Riferimenti correlati: PMID:10384095 PMID:26507128
• Inoltre, CD3E agisce come recettore per ITPRIPL1, inibendo l'attivazione delle cellule T tramite la promozione dell'interazione con NCK1 e il blocco della segnalazione ERK-NFkB. Riferimenti correlati: PMID:12110186 PMID:38614099
• La localizzazione subcellulare è a livello della membrana cellulare; la proteina presenta un peptide segnale, un dominio immunoglobulinico, un'elica transmembrana e ITAM citoplasmatici.
• Parole chiave: immunità adattativa, legame disolfuro, fosfoproteina, recettore. Peso molecolare previsto ~23 kDa.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare N-terminale (aa 1-126) della CD3 epsilon umana, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosca un epitopo extracellulare; tenerne conto per le applicazioni di citometria a flusso (FC) e immunofluorescenza (IF-P) su cellule vive non permeabilizzate.
• Per il western blot (WB), la CD3 epsilon migra a circa 23 kDa in condizioni riducenti; validare la dimensione della banda osservata nel proprio sistema di campionamento utilizzando controlli positivi appropriati (ad es., lisato di cellule T Jurkat).
• Per l'immunoistochimica su sezioni incluse in paraffina (IHC-P), è necessario ottimizzare le fasi di recupero antigenico (indotto dal calore, pH 6 o 9), poiché l'epitopo potrebbe essere mascherato.
• Nell'ELISA, abbinare questo anticorpo a un anticorpo di rilevazione compatibile per sviluppare un saggio sandwich e confermare la specificità con la proteina CD3 epsilon ricombinante.

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