Anticorpo monoclonale anti-CD31/PECAM1 (APC/Cyanine7) per citometria a flusso - Q08481

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD31/PECAM1

• La molecola di adesione delle cellule endoteliali piastriniche (PECAM1/CD31) è una glicoproteina transmembrana e membro della superfamiglia delle immunoglobuline, espressa come isoforme multiple (es., ~69, 77, 80 e 81 kDa) dovute allo splicing alternativo.
• PECAM1 svolge un ruolo critico nella transmigrazione endoteliale dei leucociti (TEM) in condizioni infiammatorie; Tyr-679 è essenziale per il traffico verso il compartimento di riciclo del bordo laterale e per una TEM efficiente.
• La proteina media interazioni omofile (PECAM1-PECAM1) ed eterofile (es., con CD177) alle giunzioni endoteliali, contribuendo all'adesione cellula-cellula e alla transmigrazione dei neutrofili.
• Attraverso il legame omofilo, PECAM1 trasmette un segnale di distacco che impedisce la fagocitosi mediata dai macrofagi dei leucociti vitali, promuovendo al contempo l'ancoraggio e la fagocitosi dei leucociti apoptotici.
• PECAM1 modula l'attivazione del recettore della bradichinina BDKRB2 e regola la segnalazione ERK1/2 nelle cellule endoteliali in risposta alla bradichinina e allo shock iperosmotico.
• Studi genetici collegano PECAM1 allo sviluppo dell'aterosclerosi; induce la suscettibilità alla formazione di lesioni aterosclerotiche. Riferimenti correlati: PMID:19048083
• A livello subcellulare, PECAM1 si localizza alla membrana cellulare, alle raft di membrana e alle giunzioni cellulari, coerentemente con le sue funzioni di adesione e segnalazione.
• Nel topo, la proteina PECAM1 è espressa nel tessuto polmonare e nelle piastrine, evidenziando i suoi ruoli vascolare ed ematopoietico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 18–220 del CD31 murino) mira alla regione extracellulare N-terminale, che è probabilmente accessibile sulle cellule vive; considerare questo durante la progettazione di pannelli per la citometria a flusso con altri marcatori di superficie.
• Per la citometria a flusso, validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente in condizioni di colorazione ottimizzate (es., titolazione, tempo di incubazione, temperatura) e includere appropriati controlli di isotipo e vitalità.
• Se si targeting CD31 in compartimenti intracellulari o in condizioni in cui potrebbe essere rilasciato (shedding), valutare la necessità di protocolli di fissazione/permeabilizzazione confermando che l'epitopo rimanga accessibile.
• Dato il riportato peso proteico multiplo, confermare la specificità del coniugato eseguendo un Western blot su gel riducenti/non riducenti utilizzando un reagente di rilevamento secondario se necessario.

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