Anticorpo monoclonale di topo anti-CD31/PECAM1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P16284

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD31/PECAM1

• CD31/PECAM1 è una molecola di adesione cellulare essenziale per la migrazione transendoteliale dei leucociti (TEM) nella maggior parte delle condizioni infiammatorie. Durante la TEM cicla attraverso il compartimento di riciclo del bordo laterale (LBRC), e la fosforilazione della Tyr-690 svolge un ruolo fondamentale in questo processo. Riferimenti correlati: PMID:17580308, PMID:19342684
• Le interazioni transomofile di CD31/PECAM1 contribuiscono all'adesione cellula-cellula delle cellule endoteliali alle giunzioni cellulari. Riferimenti correlati: PMID:27958302
• Il legame eterofilo con CD177 favorisce la migrazione transendoteliale dei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:17580308
• La legazione omofila di CD31/PECAM1 trasmette un segnale di distacco che previene la fagocitosi dei leucociti vitali da parte dei macrofagi, promuovendo al contempo l'ancoraggio e l'eliminazione dei leucociti apoptotici. Riferimenti correlati: PMID:12110892
• CD31/PECAM1 modula l'attivazione del recettore della bradichinina BDKRB2 e regola la segnalazione ERK1/2 indotta dalla bradichinina o da shock iperosmotico nelle cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:18672896
• Diverse isoforme sono generate da splicing alternativo, con l'isoforma lunga predominante nella maggior parte dei tessuti. L'isoforma Delta12 è limitata alla trachea, Delta14-15 al polmone, mentre Delta14 e Delta15 presentano profili di espressione ampi che includono livelli elevati nel cuore e nelle piastrine. Riferimenti correlati: PMID:12433657, PMID:18388311
• CD31/PECAM1 si localizza sulle membrane cellulari, nelle zolle lipidiche e alle giunzioni cellulari. È particolarmente concentrato ai bordi delle cellule endoteliali, in accordo con il suo ruolo nell'adesione cellula-cellula e nella diapedesi dei leucociti. Riferimenti correlati: PMID:18388311, PMID:21464369
• La proteina è altamente glicosilata e contiene domini simili alle immunoglobuline, legami disolfuro e siti di palmitoilazione, che contribuiscono alla sua stabilità e all'associazione con la membrana.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 630-738 della coda citoplasmatica, quindi l'anticorpo riconosce la regione C-terminale. Questa caratteristica può essere utile per rilevare CD31/PECAM1 totale indipendentemente dalla glicosilazione o dalle varianti del dominio extracellulare.
• Per Western blotting, è prevista una banda di circa 83 kDa. Controllo positivo: lisati di HUVEC o di piastrine. Possono comparire più bande o uno spostamento della banda a causa di modifiche post-traduzionali o di diverse isoforme; validare sempre il risultato nel vostro specifico sistema di campioni.
• Per immunofluorescenza (IF-P), è prevista una colorazione della membrana e delle giunzioni cellulari, in particolare ai bordi delle cellule endoteliali. Per accedere all'epitopo intracellulare potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione.
• Per immunohistochimica (IHC-P), è prevista una colorazione di membrana nelle cellule endoteliali vascolari. Ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo in base al tipo di tessuto utilizzato.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere usato come reagente di cattura o di rivelazione; l'abbinamento con un altro clone diretto contro un epitopo diverso può aumentare la sensibilità.
• La reattività crociata con il topo permette studi su due specie. Tuttavia, è necessario validare l'efficacia indipendentemente per il tipo di campione di ogni specie.

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