Anticorpo Policlonale Anti-CD31/PECAM1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q08481

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD31/PECAM1

• PECAM1 (CD31) è una glicoproteina di 130 kDa appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, che funge da principale molecola di adesione cellulare sulle cellule endoteliali, le piastrine e sottogruppi di leucociti.
• Media interazioni sia omofile (PECAM1-PECAM1) che eterofile (es. con CD177), essenziali per la migrazione transendoteliale dei leucociti in condizioni infiammatorie.
• La fosforilazione di Tyr-679 nella coda citoplasmatica regola il traffico verso il compartimento di riciclo del bordo laterale, essenziale per la migrazione diretta dei leucociti attraverso le giunzioni endoteliali.
• La legazione omofila fornisce un segnale di distacco che previene la fagocitosi dei leucociti vitali, mentre ancorando i leucociti apoptotici ne facilita la rimozione.
• PECAM1 modula l'attivazione del recettore della bradichinina BDKRB2 e la segnalazione ERK1/2 indotta da shock osmotico nelle cellule endoteliali, collegando l'adesione a vie intracellulari.
• Contribuisce alla suscettibilità all'aterosclerosi, come dimostrato in modelli murini. Riferimenti correlati: PMID:19048083
• Localizzata alle membrane cellulari, ai lipid rafts e alle giunzioni cellulari, coerente con i suoi ruoli nell'adesione e nella segnalazione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono ponti disolfuro, glicosilazione, palmitoilazione e fosforilazione; lo splicing alternativo genera isoforme con proprietà funzionali distinte.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio C-terminale intracellulare (aa 630–738); pertanto, l'anticorpo rileva PECAM1 a lunghezza intera legato alla membrana e potrebbe non riconoscere le isoforme solubili prive della coda citoplasmatica. Validare la specificità con controlli negativi appropriati.
• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 81 kDa, ma l'estesa glicosilazione N-legata può causare una migrazione a 120–130 kDa. Utilizzare lisati di cellule endoteliali (es. HUVEC, bEnd.3) o estratti piastrinici come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P) e nell'immunoistochimica (IHC-P), PECAM1 mostra una colorazione membranosa e giunzionale. Per IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; testare il tampone citrato o EDTA e confrontare con controlli isotipo.
• Per le applicazioni ELISA, considerare di rivestire con il dominio extracellulare ricombinante di PECAM1 o con lisati cellulari, e ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento.

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