Anticorpo policlonale anti-CD324/E-Caderina per WB, ELISA - P09803

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della Caderina-1

• La Caderina-1 (CDH1, E-caderina) è una proteina di adesione cellulare calcio-dipendente che media le interazioni omofile, contribuendo allo smistamento cellulare e al mantenimento dell'integrità del tessuto epiteliale (PubMed:11976333). Riferimenti correlati: PMID:11976333
• Regola la mobilità e la proliferazione delle cellule epiteliali e funge da potente soppressore dell'invasione tumorale.
• La CDH1 promuove l'organizzazione delle fibre di actina radiali nelle giunzioni cellulari attraverso l'interazione con l'angiomotina-simile 2 (AMOTL2) e facilita l'assemblaggio precoce dei desmosomi reclutando desmogleina-2 (DSG2) e desmoplachina (DSP).
• La proteina si localizza principalmente nelle giunzioni aderenti e nei desmosomi sulla membrana cellulare, ma si trova anche negli endosomi, nel network trans-Golgi e nel citoplasma.
• La CDH1 è ampiamente espressa nei tessuti epiteliali non neurali; a livello proteico, viene rilevata nei cheratinociti epidermici fin dalla nascita, nelle cellule pilastri interne ed esterne dell'organo del Corti e nei macrofagi dei granulomi (PubMed:30639848, PubMed:27760340, PubMed:18079750, PubMed:27375112, PubMed:30660666). Riferimenti correlati: PMID:30639848 PMID:27760340 PMID:18079750 PMID:27375112 PMID:30660666
• È stato dimostrato che un frammento proteolitico C-terminale, E-Cad/CTF2, promuove la degradazione non amiloidogenica dei precursori dell'amiloide-beta e inibisce la produzione dei peptidi APP C99 e C83.
• La CdH1 di topo non funge da recettore per l'internalina A (InlA) di Listeria monocytogenes; un singolo cambiamento di residuo superficiale può conferire suscettibilità all'assorbimento batterico.
• Le modifiche post-traduzionali includono il taglio a livello dei residui basici, la formazione di ponti disolfuro, la glicosilazione, la fosforilazione e l'ubiquitinazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 157–369 all'interno dei domini di ripetizione extracellulare della caderina; la natura policlonale può portare al riconoscimento di molteplici epitopi e al rilevamento sia della forma intera che di quelle processate dell'E-caderina.
• Nel Western blotting, aspettarsi una banda predominante vicino a 98 kDa; considerare l'utilizzo di linee cellulari epiteliali come MCF-7 (umano) o 4T1 (topo) come controlli positivi e validare con controlli di caricamento appropriati.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale e includere ioni calcio nei tamponi di saggio per preservare la conformazione nativa dell'E-caderina.
• Data la reattività crociata riportata con uomo e topo, verificare la specificità nel proprio tipo di campione; i livelli di espressione endogena possono variare tra i diversi tessuti epiteliali.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; aliquotare e conservare alle temperature raccomandate al ricevimento, tenendo presente che la condizione di spedizione (borsa del ghiaccio) implica una stabilità a breve termine durante il transito.

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