Anticorpo monoclonale anti-CD352/SLAMF6 per WB, IHC-P, FC, ELISA - Q96DU3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD352/SLAMF6

• SLAMF6 (noto anche come NTB-A, Ly108, CD352) è un membro della famiglia delle molecole di attivazione linfocitaria (SLAM), che funziona come recettore auto-ligando modulando sia le risposte immunitarie innate che adattative attraverso interazioni cellula-cellula omotipiche o eterotipiche.
• SLAMF6 innesca l'attività citolitica specificamente nelle cellule natural killer (NK) che esprimono alte densità superficiali di recettori di citotossicità naturale. Riferimenti correlati: PMID:11489943 PMID:16920955
• La segnalazione positiva nelle cellule NK coinvolge la fosforilazione di VAV1 e dipende dalla proteina adattatrice SH2D1B/EAT-2. Riferimenti correlati: PMID:16920955
• Nei linfociti T, SLAMF6 promuove la differenziazione verso il fenotipo Th17, portando a un aumento della secrezione di IL-17 tramite il reclutamento di RORC sul promotore IL-17; questa attività co-stimolatoria richiede SH2D1A/SAP. Riferimenti correlati: PMID:16920955 PMID:22184727 PMID:22989874
• Insieme a SLAMF1 e CD84/SLAMF5, SLAMF6 può agire come regolatore negativo della risposta immunitaria umorale e, in assenza di SH2D1A/SAP, può trasmettere segnali inibitori alle cellule T CD4+ e alle cellule NKT.
• SLAMF6 regola negativamente la formazione del centro germinativo inibendo l'adesione cellula T-cellula B; questa funzione è associata a un aumento del reclutamento della fosfatasi PTPN6/SHP-1.
• La proteina è una glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo situata sulla membrana cellulare. È espressa da tutte le cellule NK a riposo e attivate, cellule T e linfociti B, con una espressione superficiale elevata riportata sulle cellule T di pazienti con lupus eritematoso sistemico (SLE). Riferimenti correlati: PMID:11489943 PMID:22184727
• SLAMF6 subisce splicing alternativo, dando origine a multiple isoforme; è modificata da glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione su residui tirosina chiave all'interno dei suoi motivi di commutazione basati su tirosina del recettore immunitario (ITSM).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 24–215) di SLAMF6 umano; l'anticorpo monoclonale di coniglio dovrebbe riconoscere la proteina nativa espressa sulla superficie nella citometria a flusso e potrebbe essere adatto per studi di immunofluorescenza e blocco funzionale.
• Per il Western blot, prevedere bande specifiche intorno a 24 kDa (previste per alcune isoforme) e 37 kDa (forme con splicing alternativo/glicosilate); convalidare i pesi molecolari osservati nel tuo lisato.
• Per l'immunoistochimica (tessuto incluso in paraffina, IHC‑P), eseguire il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6,0) e ottimizzare la diluzione dell'anticorpo primario utilizzando un tessuto di controllo positivo noto (es. tonsilla o linfonodo).
• Per la citometria a flusso, utilizzare 0,5–1 µg di anticorpo per milione di cellule in un volume di colorazione di 100 µL; assicurare la vitalità poiché SLAMF6 è un marcatore di superficie.
• Quando si imposta un sistema di rilevamento ELISA, abbinare a una coppia di anticorpi di cattura/rilevamento corrispondente o utilizzare questo monoclonale ricombinante come reagente di rilevamento in formato sandwich.

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