Anticorpo policlonale di coniglio Anti-CD3D per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04234

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CD3D

• CD3D codifica la catena delta della glicoproteina di superficie delle cellule T, nota anche come catena delta del recettore per le cellule T T3. È una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo e un componente chiave del complesso TCR-CD3.
• Come parte del complesso TCR-CD3, CD3D è essenziale per l'immunità adattativa. Dopo il riconoscimento dell'antigene da parte del TCR, le catene CD3 trasmettono segnali di attivazione attraverso la membrana cellulare tramite i loro motivi di attivazione a base di tirosina del immunorecettore (ITAM). Questi ITAM vengono fosforilati dalle chinasi della famiglia Src LCK e FYN, avviando cascate di segnalazione a valle (PubMed:2470098). Riferimenti correlati: PMID:2470098
• CD3D svolge un ruolo fondamentale nella differenziazione dei timociti, garantendo la corretta assemblaggio del complesso TCR-CD3 e la sua espressione superficiale. Interagisce inoltre con i co-recettori CD4 e CD8, stabilendo un legame funzionale tra il TCR e questi co-recettori, necessario per la selezione positiva delle cellule T CD4+ e CD8+ (PubMed:12215456). Riferimenti correlati: PMID:12215456
• Subcellularmente, CD3D è localizzato sulla membrana cellulare, coerente con la sua funzione di recettore di segnalazione transmembrana.
• CD3D è espresso prevalentemente sui linfociti T insieme ad altri componenti del TCR-CD3. È presente anche sulle cellule NK fetali, indicando un ruolo più ampio nello sviluppo dei linfociti.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione degli ITAM, la glicosilazione N-linked e la formazione di legami disolfuro, tutti critici per la sua struttura e le sue funzioni di segnalazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il Western blotting, tenere conto che l'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 22–105 della regione extracellulare; è prevista una banda vicino a 19 kDa. Utilizzare un controllo positivo adatto come il lisato di cellule Jurkat.
• In IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e validare la colorazione con tessuti noti ricchi di cellule T (ad es. tonsilla, linfonodo).
• Per IF/ICC, la permeabilizzazione è necessaria per rilevare CD3D, e la co-colorazione con CD4/CD8 può aiutare a confermare la specificità per le cellule T. Validare il protocollo nel proprio sistema di campioni.
• In ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione dopo aver confermato le sue prestazioni con CD3D ricombinante o lisati cellulari; la reattività incrociata con CD3D di ratto consente la progettazione di saggi multiple-specie.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, può riconoscere più epitopi; pertanto, confermare la specificità in ogni applicazione utilizzando appropriati controlli knockout o knockdown.

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