Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD40 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P25942

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD40

• Il CD40, noto anche come membro 5 della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale (TNFRSF5), Bp50 o CDw40, è un recettore della superficie cellulare espresso principalmente sulle cellule B e sui carcinomi primitivi.
• Funziona come recettore per il ligando del CD40 (TNFSF5/CD40LG), avviando cascate di segnalazione intracellulari che coinvolgono TRAF6 e MAP3K8, attivando infine ERK e promuovendo la secrezione di immunoglobuline. Riferimenti correlati: PMID:31331973
• Il CD40 è localizzato principalmente nella membrana cellulare, ma è stata identificata anche un'isoforma secreta generata da splicing alternativo.
• La proteina contiene diversi motivi strutturali fondamentali per la sua funzione, tra cui un peptide segnale, un'elica transmembrana, legami disolfuro e siti di glicosilazione.
• Il CD40 svolge un ruolo centrale nell'immunità umorale mediando l'attivazione, la proliferazione e la differenziazione delle cellule B.
• Le varianti del gene CD40 sono state associate a fenotipi patologici, sottolineandone l'importanza nella regolazione immunitaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo policlonale di coniglio comprende un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 198–277 del CD40 umano, una regione probabilmente extracellulare e prossima alla membrana; questo design può consentire il riconoscimento sia delle forme native sia di quelle denaturate.
• Per le applicazioni di Western blot, utilizzare una preparazione standard del campione in condizioni riducenti e denaturanti. Validare l'anticorpo in linee cellulari B umane (ad es. Ramos, Raji) o in lisati di splenociti murini. La banda prevista è di circa 31 kDa.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, aspettarsi un pattern di colorazione membranoso. Ottimizzare il recupero antigenico per i tessuti inclusi in paraffina e considerare adeguate fasi di blocco per ridurre al minimo il background aspecifico.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rivelazione, ma l'abbinamento con un anticorpo monoclonale validato può migliorare la specificità del test. È consigliabile titolare l'anticorpo per ogni nuova applicazione.

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