Anticorpo policlonale coniglio anti-CD40L per WB e ELISA - P29965

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e localizzazione del CD40L

• Il CD40L funge da ligando citochinico cruciale per il CD40 (TNFRSF5) sulle cellule presentanti l'antigene, essenziale per l'immunità umorale dipendente dalle cellule T (PubMed:1280226, PubMed:31331973). Riferimenti correlati: PMID:1280226 PMID:31331973
• Fornisce segnali di co-stimolazione alle cellule T, migliorando la proliferazione e la produzione di citochine come IL-4 e IL-10 a seguito del legame TCR/CD3 e della co-stimolazione CD28 (PubMed:8617933). Riferimenti correlati: PMID:8617933
• L'incrocio del CD40L attiva la via NF-kappa-B e l'attivazione delle chinasi MAPK8 e PAK2, e induce la fosforilazione della tirosina dell'isoforma 3 del CD28 nelle cellule T (PubMed:15067037). Riferimenti correlati: PMID:15067037
• Media la proliferazione delle cellule B, la commutazione di classe delle immunoglobuline e la produzione di IgE in presenza di IL-4, evidenziando il suo ruolo nell'attivazione delle cellule B.
• Il CD40L è anche un ligando integrinico per ITGA5:ITGB1 e ITGAV:ITGB3, lavorando in concerto con il CD40 per regolare gli esiti di segnalazione come l'attivazione delle cellule B e le risposte anti-apoptotiche.
• La proteina è localizzata alla membrana cellulare e alla superficie cellulare, e può essere clivata per produrre una forma secreta; è espressa specificamente sui linfociti T CD4+ attivati.
• Con una massa molecolare calcolata di ~29,3 kDa, la glicosilazione aumenta la dimensione osservata a circa 33–39 kDa nella sua forma attiva a lunghezza intera.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 113–261, coprendo il dominio di omologia TNF extracellulare critico per il legame al recettore; questo design può conferire reattività sia alla forma legata alla membrana che a quella solubile del CD40L.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto del CD40L non glicosilato è di ~29 kDa, ma le forme glicosilate possono apparire intorno a 33–39 kDa; verificare la specificità della banda utilizzando lisati di cellule T attivate o controlli di proteina ricombinante.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento, abbinato a una coppia di anticorpi CD40L convalidata, e ottimizzare il rivestimento con proteina CD40L ricombinante o saggi basati su cellule.
• È stata riportata reattività crociata con CD40L umano e murino; validare nella specie e nel sistema di saggio selezionati prima dell'uso.

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