Anticorpo monoclonale rabbit anti-CD44 (validato KO) per WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P16070

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD44

• CD44 è una proteina di membrana a passaggio singolo di tipo I che funge da recettore principale per l'ialuronano (HA) e interagisce anche con collagene, fattori di crescita, citochine e proteasi, permettendo alle cellule di percepire e rispondere ai cambiamenti del microambiente tissutale. Riferimenti correlati: PMID:16541107, PMID:19703720, PMID:22726066, PMID:18757307, PMID:23589287
• CD44 media l'attivazione, l'homing e la ricircolazione dei linfociti, nonché l'ematopoiesi e le risposte infiammatorie alle infezioni batteriche. Riferimenti correlati: PMID:7528188
• La segnalazione intracellulare di CD44 prevede l'assemblaggio di complessi proteici con chinasi recettoriali e proteasi di membrana, che porta all'attivazione di PKN2, RAC1, RHOA e fosfolipasi C, che promuovono la riorganizzazione del citoscheletro e la mobilizzazione del calcio. Riferimenti correlati: PMID:18757307, PMID:23589287, PMID:15123640
• La proteina si localizza principalmente sulla membrana plasmatica e sulle microvilli, ma un ectodominio solubile può essere rilasciato nello spazio extracellulare.
• L'splicing alternativo genera più isoforme; l'isoforma epiteliale 10 (CD44v) è altamente espressa nei carcinomi, mentre le cellule di neuroblastoma reprimono la sua espressione.
• A livello proteico, CD44 è rilevato in fibroblasti, urine e placenta. Riferimenti correlati: PMID:25326458, PMID:36213313, PMID:37453717, PMID:32337544
• La proteina è ampiamente modificata da glicosilazione, fosforilazione e aggiunta di proteoglicani, e presenta legami disolfuro; è anche coinvolta nell'internalizzazione del virus dell'afta epizootica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio N-terminale di legame all'ialuronano (aa 20–178), che è conservato ed esposto sulla superficie; questo anticorpo può quindi rilevare più isoforme di CD44 e conformazioni native in applicazioni come WB e IF/ICC.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è ~82 kDa, ma un'estesa glicosilazione può causare un pattern di bande diffuso o simile a una scala; considera il pretrattamento con PNGasi F o altre deglicosilasi per confermare la specificità.
• Per la citometria a flusso, ottimizza la titolazione dell'anticorpo e includi controlli isotipici per quantificare accuratamente l'espressione di CD44 su sottopopolazioni di linfociti, cellule di carcinoma o altre popolazioni rilevanti.
• Dato il rilascio dell'ectodominio di CD44, la preparazione dei campioni per i saggi basati su ELISA deve considerare se rilevare la CD44 solubile totale o isoforme specifiche; includi standard appropriati e passaggi di blocco.

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