Anticorpo monoclonale anti-CD45 per WB, IHC-P, mIHC, ELISA - P08575

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45, ufficialmente designato recettore tirosin-fosfatasi proteica di tipo C (PTPRC), è noto anche come antigene leucocitario comune (L-CA), T200 e B220 (nel contesto specifico degli isoformi). È una glicoproteina transmembrana chiave espressa su tutte le cellule ematopoietiche nucleate.
• Questa fosfatasi è essenziale per l'attivazione delle cellule T e agisce come regolatore positivo della co-attivazione delle cellule T dopo il legame con DPP4. Il suo primo dominio fosfatasico possiede attività enzimatica, mentre il secondo modula la specificità del substrato. Dopo l'attivazione delle cellule T, il CD45 recluta e defosforila molecole di segnalazione come SKAP1, FYN e LYN. Riferimenti correlati: PMID:35767951
• Nel contesto dell'infezione microbica, il CD45 funge da recettore per la proteina UL11 del citomegalovirus umano, mediando il legame di UL11 alle cellule T. Questa interazione porta a una ridotta fosforilazione tirosinica delle proteine di segnalazione dopo lo stimolo del TCR e a una compromessa proliferazione delle cellule T.
• A livello subcellulare, il CD45 si localizza sulla membrana cellulare, con arricchimento nei raft di membrana e alla sinapsi immunologica, sottolineando il suo ruolo negli eventi di segnalazione prossimale.
• Il gene PTPRC subisce un ampio splicing alternativo, dando origine a molteplici isoformi (es. isoformi 1–8) che mostrano distinti pattern di espressione tessuto-specifica, in particolare nei timociti.
• Le modifiche post-traduzionali includono la N-glicosilazione e la fosforilazione, e le mutazioni in PTPRC sono collegate a immunodeficienza combinata grave (SCID).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, considerare l'elevato peso molecolare (~147 kDa) utilizzando un gel SDS-PAGE a bassa percentuale appropriato e condizioni di trasferimento estese. Includere un lisato di controllo positivo da una linea cellulare leucocitaria umana (es. Jurkat) per verificare la specificità della banda.
• In IHC-P e mIHC, ottimizzare il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e titolare la concentrazione dell'anticorpo, poiché la reattività è specifica per l'umano. Eseguire una controcolorazione con un colorante nucleare per visualizzare la morfologia cellulare.
• Per ELISA, questo anticorpo monoclonale può fungere da reagente di rilevamento; considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura che riconosce un epitopo CD45 non sovrapposto se si sviluppa un saggio sandwich.

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