Anticorpo monoclonale coniglio anti-CD45 per IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P06800

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45, noto anche come antigene comune dei leucociti (L-CA), Ly-5 o T200, è una fosfatasi proteica tirosinica di tipo recettoriale C codificata dal gene Ptprc nei topi. È una glicoproteina transmembrana con un peso molecolare di circa 145 kDa.
• Il CD45 è essenziale per l'attivazione delle cellule T attraverso il recettore dell'antigene. Funziona come regolatore positivo della co-attivazione delle cellule T dopo il legame con DPP4.
• La regione intracellulare contiene due domini di fosfatasi proteica tirosinica (PTP) in tandem. Il primo dominio possiede attività catalitica, mentre il secondo modula la specificità del substrato.
• Durante l'attivazione delle cellule T, il CD45 recluta e defosforila molecole di segnalazione come SKAP1 e FYN, e defosforilla anche LYN per modulare la sua attività.
• Il CD45 interagisce con CLEC10A nel sito di contatto tra le cellule presentanti l'antigene e le cellule T. Questa interazione, che coinvolge il CD45 che trasporta l'antigene Tn sulle cellule T effettrici e CLEC10A sulle cellule dendritiche immature, aiuta a regolare le soglie di attivazione delle cellule T per prevenire l'autoimmunità.
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare, sui raft di membrana e sulle sinapsi immunologiche, coerentemente con il suo ruolo nella segnalazione prossimale. Le modifiche post-traduzionali includono lo splicing alternativo e la fosforilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 26–566 del CD45 murino (la regione extracellulare), suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce un epitopo extracellulare. Questo lo rende adatto per la colorazione di cellule viventi e la citometria a flusso senza permeabilizzazione.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC) e l'immunoistochimica (IHC-P), considerare l'ottimizzazione delle condizioni di fissazione (es. 4% PFA) e, se necessario, utilizzare una permeabilizzazione lieve per garantire l'accesso dell'anticorpo preservando l'integrità dell'epitopo.
• Quando si esegue la citometria a flusso (FC), titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo specifico di cellule murine e includere i controlli di isotipo appropriati.
• Questo anticorpo è validato per l'uso con campioni di topo. La reattività crociata con altre specie non è stata riportata; verificare nel proprio sistema se necessario.

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