Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD45 per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P08575

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD45

• CD45 (proteina tirosina fosfatasi C di tipo recettoriale), noto anche come antigene comune dei leucociti (L-CA), LY5, B220 e T200, è codificato dal gene PTPRC. Dallo splicing alternativo derivano diverse isoforme.
• È un regolatore positivo fondamentale dell'attivazione delle cellule T attraverso il recettore dell'antigene. Il primo dominio fosfatasico possiede attività catalitica, mentre il secondo modula la specificità per il substrato. Riferimenti correlati: PMID:35767951
• CD45 defosforila molecole chiave della segnalazione: in seguito all'attivazione delle cellule T, recluta e defosforila SKAP1 e FYN e modula l'attività di LYN. L'interazione con CLEC10A all'interfaccia tra cellule dendritiche e cellule T modula la soglia di attivazione per limitare l'autoreattività.
• Agisce come recettore per la proteina UL11 del citomegalovirus umano, mediando il legame alle cellule T e compromettendo la segnalazione del TCR e la proliferazione.
• A livello subcellulare, CD45 è localizzato sulla membrana cellulare, nei rafts di membrana e nella sinapsi immunologica. È ampiamente glicosilato e fosforilato.
• Espressione delle isoforme specifica per il tessuto: le isoforme 1, 2, 3, 5 e 7 sono rilevate nei timociti, mentre le isoforme 4, 6 e 8 non lo sono.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 147 kDa; validare l'anticorpo in lisati leucocitari appropriati di origine umana, murina o di ratto.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), è possibile ottenere l'arricchimento di CD45; gli esperimenti di co-immunoprecipitazione possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di lisi e lavaggio.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC e IF-P), è necessario ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione; la marcatura superficiale di CD45 può essere eseguita senza permeabilizzazione.
• L'immunogeno (aa 611–730) si trova nella regione extracellulare, suggerendo una potenziale idoneità per la marcatura della superficie di cellule vive, sebbene sia raccomandata la validazione.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto rende questo anticorpo un candidato per studi multicentrici; verificare sempre la specificità nel sistema di campioni pertinente.

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