Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD46 per WB, IF/ICC, FC, ELISA - P15529

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD46

• CD46, noto anche come proteina cofattore di membrana (MCP) o antigene comune dei leucociti del trofoblasto (TLX), è una glicoproteina di membrana di tipo I appartenente al cluster genico dei regolatori dell'attivazione del complemento (RCA).
• Funziona come cofattore per la serin-proteasi fattore I, consentendo la scissione e l'inattivazione di C3b e C4b depositati sulle cellule dell'ospite, proteggendo così le cellule autologhe dai danni mediati dal complemento.
• CD46 svolge un ruolo nella fecondazione partecipando alla fusione spermatozoo-uovo ed è localizzato sulla membrana acrosomiale interna degli spermatozoi.
• Agisce come molecola costimolatoria per le cellule T, promuovendo la differenziazione delle cellule T CD4+ in cellule T regolatorie di tipo 1 (Tr1) secernenti interleuchina-10, che sopprimono le risposte immunitarie e contribuiscono a prevenire l'autoimmunità.
• CD46 media l'evasione immunitaria fungendo da recettore per diversi patogeni, inclusi gli adenovirus (sottogruppo B2/Ad3), il virus del morbillo, HHV-6 e batteri patogeni come Neisseria meningitidis e Streptococcus pyogenes. Riferimenti correlati: PMID:11260136, PMID:11971006, PMID:7708671, PMID:32581096
• Espresso sulla superficie di tutte le cellule nucleate ad eccezione degli eritrociti, CD46 si trova anche nelle vescicole citoplasmatiche e nelle vescicole secretorie.
• Le varianti genetiche di CD46 sono associate alla sindrome emolitico-uremica atipica (AHUS2), sottolineandone il ruolo fondamentale nella regolazione del complemento.
• La proteina matura ha un peso molecolare previsto di circa 44 kDa e appare come una banda di 37-44 kDa nel western blot a causa della glicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione extracellulare N-terminale (aa 35-328), che comprende molteplici domini sushi fondamentali per il legame ai ligandi; ciò può contribuire al riconoscimento del CD46 nativo in applicazioni come WB, IF e FC.
• Per il western blot, è prevista una banda a 37-44 kDa; si consiglia di utilizzare controlli positivi e negativi appropriati e di ottimizzare i tamponi di lisi e le condizioni di blocco in base al tipo di campione.
• Nell'immunofluorescenza e nella citometria a flusso, validare l'anticorpo secondo i propri protocolli specifici di fissazione/permeabilizzazione; tenere presente che CD46 è ampiamente espresso, quindi regolare di conseguenza il numero di cellule e le concentrazioni di colorazione.
• Per le applicazioni ELISA, verificare la compatibilità con il formato dell'antigene (ad esempio, proteina ricombinante o lisati cellulari) e includere curve standard appropriate.
• Poiché CD46 è coinvolto anche nella costimolazione delle cellule T, i saggi funzionali possono richiedere una titolazione accurata; consultare la letteratura per le condizioni specifiche del saggio.

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