Anticorpo monoclonale anti-CD50 (ICAM-3) per FC - P32942

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD50 (ICAM-3)

• Il CD50, noto anche come ICAM-3 o CDw50, è un membro della famiglia delle molecole di adesione intercellulare (ICAM) e funziona come ligando per l'integrina LFA-1 (ITGAL/ITGB2), mediando l'adesione dei leucociti e facilitando la fagocitosi dei neutrofili apoptotici da parte dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Agisce come ligando per l'integrina ITGAD/ITGB2, contribuendo alle interazioni cellula-cellula all'interno del sistema immunitario. Riferimenti correlati: PMID:8777714
• Il CD50 si lega al CD209 sulle cellule dendritiche attraverso un meccanismo dipendente dal Ca²⁺ e indipendente dalle integrine, stabilendo il contatto iniziale tra le cellule dendritiche e le cellule T quiescenti e promuovendo la proliferazione delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:10721994
• La proteina è espressa costitutivamente solo sui leucociti quiescenti ed è assente sulle cellule endoteliali quiescenti o attivate dalle citochine. Riferimenti correlati: PMID:8325327 PMID:1448174
• A livello subcellulare, il CD50 si localizza sulla membrana cellulare ed è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo.
• Appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline e contiene domini di tipo Ig multipli, legami disolfuro e siti di glicosilazione, ed è soggetto a fosforilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro il dominio extracellulare (amminoacidi 30–114), quindi ci si aspetta che questo anticorpo riconosca la conformazione superficiale nativa del CD50 sulle cellule vive. Considerare l'uso di controlli di isotipo appropriati e coloranti vitali nella citometria a flusso per selezionare le cellule vive singole.
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tipo di cellule specifico e le condizioni sperimentali. Un intervallo iniziale di 0,5–5 µg per milione di cellule è tipico per gli anticorpi coniugati.
• Dato che il CD50 è espresso su tutti i leucociti quiescenti, validare l'anticorpo su popolazioni cellulari note positive e negative (es., linfociti del sangue periferico rispetto alle cellule endoteliali).
• Per la colorazione intracellulare, è richiesto un passo di fissazione/permeabilizzazione; tuttavia, si noti che questo anticorpo mira a un epitopo extracellulare e potrebbe funzionare al meglio sulla colorazione di superficie di cellule non fissate.

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