Anticorpo policlonale anti-CD59 per WB, ELISA - P13987

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD59

• La glicoproteina CD59 (nota anche come protectina, HRF20, MACIF, MIRL, MAC-IP) è un inibitore di superficie cellulare del complesso di attacco alla membrana del complemento (MAC).
• Inibisce potentemente l'assemblaggio del MAC legandosi ai componenti C8 (C8A e C8B) e impedendo l'incorporazione di C9 nel poro in formazione, proteggendo così le cellule umane dalla lisi mediata dal complemento. Riferimenti correlati: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Una forma solubile di CD59, trovata nelle urine, mantiene il legame al complemento ma mostra un'attività inibitoria del MAC notevolmente ridotta sulle membrane cellulari.
• Il CD59 è ancorato alla membrana plasmatica tramite un legame glicosilfosfatidilinositolo (GPI) ed è rilevabile anche come proteina secreta.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro e glicazione, che contribuiscono alla sua stabilità strutturale e funzione.
• La deficienza genetica del CD59 è associata all'anemia emolitica ereditaria, sottolineando il suo ruolo critico nella protezione degli eritrociti dall'attacco del complemento.
• Il gene CD59 subisce splicing alternativo, producendo varianti di trascritto multiple che possono contribuire alla diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare maturo del CD59 (aa 26–128), suggerendo che l'anticorpo riconosce principalmente la forma nativa ancorata al GPI sulle superfici cellulari e le forme solubili prive dell'ancora GPI.
• Per l'analisi Western blot di lisati cellulari o tessutali umani, è prevista una banda a circa 14 kDa; tuttavia, la N-glicosilazione può comportare una banda allargata o un peso molecolare apparente leggermente superiore. Si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e di validare con controlli appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato per la cattura dell'antigene o per il rilevamento del CD59 nel siero umano, plasma o preparazioni di proteine ricombinanti. Sono raccomandati esperimenti di titolazione (es. rivestimento 1–5 µg/mL) per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Come reagente policlonale, confermare sperimentalmente la reattività crociata di specie se si studiano modelli non umani e includere controlli negativi appropriati per tenere conto di qualsiasi legame aspecifico.

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