Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD59 per WB, ELISA - P13987

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD59

• La glicoproteina CD59 (protectina, HRF-20, MAC-IP, MIRL) è un potente inibitore del complesso di attacco alla membrana del complemento (MAC), proteggendo le cellule umane dalla lisi mediata dal complemento. Riferimenti correlati: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111
• Agisce legandosi ai componenti C8 e C9 del MAC, formando un foglietto beta intermolecolare che blocca l'incorporazione di multiple molecole di C9, prevenendo così la formazione di pori osmolitici. Riferimenti correlati: PMID:36797260
• La forma solubile del CD59, trovata nelle urine, conserva l'attività di legame al complemento ma mostra un'inibizione del MAC sulle membrane cellulari notevolmente ridotta.
• Il CD59 è localizzato sulla membrana cellulare tramite un'ancora GPI ed è anche secreto.
• È una glicoproteina con ponti disolfuro ed è annotata come lipoproteina in UniProt.
• Difetti genetici nel CD59 causano anemia emolitica ereditaria dovuta a un aumento della lisi dei globuli rossi mediata dal complemento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 26–126 del CD59 umano, che include il dominio di legame al MAC. Questo design dell'immunogeno mira al riconoscimento della proteina nativa nei saggi pertinenti.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari umane (es. HeLa, Jurkat) che esprimono CD59. In condizioni riducenti, la proteina può migrare come una banda intorno a 14–20 kDa a causa della glicosilazione.
• Per l'ELISA, l'immunogeno peptidico può fornire un'elevata specificità; validare in formati ELISA diretti o sandwich utilizzando come controlli positivi CD59 ricombinante o il peptide immunogeno.
• Ottimizzare le diluizioni dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento nel proprio sistema sperimentale specifico, poiché le prestazioni possono variare con la preparazione del campione e le condizioni del tampone.

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