Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD62P/P-selectina per WB, IHC-P, IF-P, ELISA - P16109

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della P-selectina

• La P-selectina (SELP), anche designata CD62P, GMP-140, LECAM3 e PADGEM, è un membro della famiglia delle selectine delle molecole di adesione cellulare. È una glicoproteina transmembrana di tipo I che presenta un dominio lectina di tipo C N-terminale, un dominio simile all'EGF, multiple ripetizioni sushi (SCR) e una coda citoplasmatica.
• Funziona come un recettore Ca²⁺-dipendente che lega ligandi carboidratici, principalmente sialil-Lewis X, su cellule mieloidi come neutrofili e monociti. Questa interazione media l'ancoraggio iniziale e il rolling dei leucociti sull'endotelio attivato e sulle piastrine durante l'infiammazione.
• Attraverso il suo contro-recettore SELPLG (PSGL-1) sui leucociti, la P-selectina supporta il rolling dei leucociti lungo le superfici vascolari, un prerequisito critico per l'adesione ferma e l'extravasazione.
• Inoltre, la P-selectina facilita le interazioni cellula-cellula e l'adesione impegnando l'integrina αIIb/β3 (ITGA2B:ITGB3) e αV/β3 (ITGAV:ITGB3), contribuendo alla formazione di aggregati piastrine-leucociti. Riferimenti correlati: PMID:37184585
• A livello subcellulare, la P-selectina è immagazzinata nei granuli α delle piastrine e nei corpi di Weibel–Palade delle cellule endoteliali. Dopo l'attivazione cellulare da parte di agonisti come trombina o istamina, viene rapidamente traslocata alla membrana plasmatica.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di ponti disolfuro, la palmitoilazione su residui di cisteina citoplasmatici e la glicosilazione N-legata. Parole chiave: Adesione cellulare, Calcio, Ponte disolfuro, Glicoproteina, Lipoproteina, Membrana, Legame metallico.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 91 kDa e può mostrare spostamenti di mobilità su SDS-PAGE a causa della glicosilazione eterogenea.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 42–771 della P-selectina umana, corrispondenti a quasi l'intera regione extracellulare. Questo design favorisce il riconoscimento delle conformazioni native nelle applicazioni basate su cellule.
• Per il Western blotting, considerare l'uso di condizioni riducenti e di uno standard di peso molecolare vicino a 91 kDa. A causa della glicosilazione, la banda può apparire diffusa o migrare leggermente più in alto.
• Nell'immunohistochimica (paraffina), si raccomanda il recupero dell'antigene (basato su calore o enzimi); validare la specificità dell'anticorpo su tessuto infiammato dove l'espressione della P-selectina è upregolata.
• Per l'immunofluorescenza, la permeabilizzazione consente il rilevamento sia dei depositi intracellulari che della proteina traslocata in superficie. La co-localizzazione con marcatori organellari (ad es. fattore di von Willebrand per i corpi di Weibel–Palade) può essere istruttiva.
• Essendo un monoclonale di coniglio, questo anticorpo è compatibile con protocolli di colorazione multipla che utilizzano anticorpi primari di topo.

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