Anticorpo monoclonale Anti-CD63 per WB, IHC-P, ELISA - P08962

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD63

• CD63 è un membro della superfamiglia delle tetraspanine, nota anche come granulofisina, LAMP-3, ME491 e Tspan-30, e svolge ruoli diversificati nell'adesione cellulare, nella segnalazione e nel traffico vescicolare.
• Funziona come recettore di superficie cellulare per TIMP1, attivando la segnalazione a valle attraverso le vie ITGB1/integrina che promuovono la sopravvivenza cellulare, la migrazione e la riorganizzazione del citoscheletro tramite AKT, FAK/PTK2 e MAP chinasi.
• CD63 partecipa alla segnalazione di VEGFA regolando l'internalizzazione di KDR/VEGFR2 ed è essenziale per il traffico normale del dominio luminal PMEL richiesto per lo sviluppo e la maturazione dei melanociti.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare, sulle membrane lisosomiali e degli endosomi tardivi, sui corpi multivesicolari e sui melanosomi; può essere secreta sugli esosomi extracellulari, riflettendo il suo coinvolgimento sia nel trasporto intracellulare che nella comunicazione intercellulare.
• CD63 è altamente glicosilato e palmitoilato, con un peso molecolare osservato compreso tra 17 kDa e 25 kDa a causa della glicosilazione variabile, che è fondamentale per il suo traffico e le interazioni funzionali.
• L'espressione tissutale è prominente nelle piastrine, nei melanociti (nei nevi displastici, nei melanomi primari), nelle cellule ematopoietiche e nei macrofagi tissutali, evidenziando la sua rilevanza nella biologia del cancro e delle cellule immunitarie.
• Contribuisce all'extravasazione dei leucociti regolando il traffico di SELP verso la superficie endoteliale e può modulare la degranulazione dei mastociti specificamente tramite la stimolazione di Ms4a2/FceRI.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, preparare i campioni in condizioni riducenti e tenere conto che CD63 migra come banda diffusa o più bande tra 17 e 25 kDa a causa della sua glicosilazione eterogenea; convalidare la specificità con controlli appropriati.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), sono raccomandati metodi robusti di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato, pH 6,0, indotto da calore) a causa della natura transmembrana dell'antigene; testare su tessuti positivi noti come melanoma o sezioni ricche di piastrine.
• Per le applicazioni ELISA, abbinare questo anticorpo a reagenti di rilevamento appropriatamente compatibili e confermare linearità e sensibilità usando standard di CD63 ricombinante o campioni biologici come lisati cellulari o preparazioni di esosomi.
• Poiché l'immunogeno corrisponde al grande anello extracellulare (amminoacidi 103-203), l'anticorpo riconosce probabilmente un epitopo accessibile in condizioni native e denaturate; tenere conto di questo aspetto nella progettazione di strategie di cattura o rilevamento.

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