Anticorpo Policlonale Anti-CD63 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08962

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD63

• CD63, noto anche come granulofisina, LAMP-3, Limp1, ME491, OMA81H e Tspan-30, è un membro della superfamiglia delle tetraspanine, caratterizzato da quattro domini transmembrana e due anse extracellulari.
• Funziona come recettore di superficie cellulare per TIMP1 e svolge un ruolo fondamentale nell'attivazione di cascate di segnalazione, inclusa la segnalazione delle integrine attraverso ITGB1, portando all'attivazione di AKT, FAK/PTK2 e chinasi MAP, promuovendo così la sopravvivenza, l'adesione, lo spiegamento e la migrazione cellulare.
• CD63 è coinvolto nel trasporto vescicolare intracellulare ed è essenziale per il normale traffico del dominio luminale di PMEL, cruciale per lo sviluppo e la maturazione dei melanociti.
• Regola l'adesione dei leucociti alle cellule endoteliali modulando il traffico di SELP e può svolgere un ruolo nella degranulazione dei mastociti tramite stimolazione di Ms4a2/FceRI.
• A livello subcellulare, CD63 si trova principalmente nelle membrane lisosomiali e degli endosomi tardivi, ma è presente anche nei corpi multivescicolari, nei melanosomi, negli esosomi extracellulari secreti e sulla superficie cellulare.
• La proteina è fortemente glicosilata e palmitoilata, caratteristiche importanti per il suo traffico e la sua funzione, ed è espressa in modo differenziale nelle piastrine, nelle cellule ematopoietiche, nei macrofagi tissutali e nelle cellule di melanoma.
• Lo splicing alternativo genera isoforme di CD63, che possono avere funzioni e localizzazioni distinte.
• Le parole chiave associate a CD63 includono glicoproteina, lipoproteina, membrana, trasporto proteico e secreto, riflettendo i suoi molteplici ruoli nei processi cellulari.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 103–203 del CD63 umano, una regione che comprende parte della grande ansa extracellulare. Questo design può consentire il riconoscimento sia della proteina a lunghezza intera che di potenziali prodotti di clivaggio; validare nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot, considerare che CD63 è fortemente glicosilato, il che può causare uno spostamento del suo peso molecolare apparente al di sopra dei 26 kDa previsti. Assicurare un'adeguata deglicosilazione proteica o utilizzare controlli positivi per confermare l'identità della banda.
• L'anticorpo è qualificato per IHC-P e IF/ICC; ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e di permeabilizzazione, soprattutto data la localizzazione intracellulare di CD63 negli endosomi e nei lisosomi.
• Per l'ELISA, valutare le prestazioni dell'anticorpo con CD63 ricombinante o nativo nel formato specifico del saggio, poiché il legame può essere influenzato dalla conformazione proteica e dalle modifiche post-traduzionali.
• L'espressione di CD63 è elevata negli esosomi; pertanto, questo anticorpo può essere utile per studi di isolamento o caratterizzazione degli esosomi se validato di conseguenza.

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