Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD68 per WB, IF/ICC, ELISA - P34810

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD68

• Il CD68, noto anche come macrosialina, GP110, LAMP4 o SCARD1, è una glicoproteina transmembrana fortemente glicosilata appartenente alla famiglia LAMP.
• È espresso prevalentemente sulla membrana degli endosomi e dei lisosomi, ma può anche riciclare rapidamente verso la superficie cellulare, suggerendo un ruolo nell'adesione e nella motilità cellulare.
• Il CD68 svolge una funzione nelle attività fagocitiche dei macrofagi, partecipando sia al metabolismo lisosomiale intracellulare sia alle interazioni extracellulari cellula-cellula e cellula-patogeno.
• Legandosi a lectine o selectine specifiche di tessuti e organi, il CD68 facilita il reclutamento di sottopopolazioni di macrofagi verso specifiche sedi anatomiche.
• La proteina contiene un dominio simile alla mucina, probabilmente coinvolto nel legame con i ligandi, e può mediare l'adesione alle selectine sulle cellule endoteliali, favorendo la disseminazione dei macrofagi e delle cellule tumorali.
• Il CD68 è altamente espresso nei monociti del sangue e nei macrofagi tissutali, ed è presente anche in linfociti, fibroblasti, cellule endoteliali e diverse linee cellulari tumorali.
• Numerose modifiche post-traduzionali, tra cui la glicosilazione legata all'N e i ponti disolfuro, contribuiscono alla sua stabilità strutturale e allo spostamento del suo peso molecolare fino a circa 110 kDa (la forma matura glicosilata), sebbene la proteina core prevista sia di circa 37 kDa.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, che possono presentare funzioni o modelli di espressione distinti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (proteina ricombinante corrispondente agli amminoacidi 16–200) è diretto contro la regione extracellulare N-terminale; l'anticorpo può riconoscere sia la proteina core sia la forma matura glicosilata.
• Per il Western blot (WB), è consigliabile testare sia condizioni riducenti sia non riducenti e tenere presente che la banda osservata può migrare tra 37 kDa (proteina core) e 110 kDa (forma glicosilata), a seconda del campione e delle condizioni sperimentali.
• Per l'immunofluorescenza/l'immunocitochimica (IF/ICC), ci si aspetta un pattern di colorazione coerente con endosomi, lisosomi e membrana cellulare; i protocolli di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzati in base al tipo cellulare.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere condizioni adeguate di rivestimento e blocco; per i saggi sandwich, si consiglia di abbinare un anticorpo di rilevazione appropriato.
• Validare l'anticorpo nelle specie pertinenti (umana, topo, ratto) e utilizzando campioni di controllo positivo appropriati, come linee cellulari di macrofagi (ad es. THP-1, RAW 264.7) o cellule mononucleate del sangue periferico.

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