Anticorpo policlonale coniglio anti-CD68 per WB, IF/ICC, ELISA - P34810

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD68

• Il CD68 è una proteina integrale di membrana pesantemente glicosilata appartenente alla famiglia delle proteine di membrana associate ai lisosomi (LAMP), nota anche come macrosialina o Gp110.
• Gioca un ruolo nelle attività fagocitarie dei macrofagi tissutali, sia nel metabolismo lisosomiale intracellulare che nelle interazioni cellula-cellula e cellula-patogeno extracellulari.
• Il CD68 si lega a lectine o selectine specifiche di tessuto e organo, permettendo l'homing di sottopopolazioni di macrofagi a particolari siti tissutali.
• La rapida ricircolazione del CD68 dagli endosomi e lisosomi alla membrana plasmatica potrebbe permettere ai macrofagi di strisciare su substrati che recano selectine o altre cellule.
• La proteina è localizzata principalmente alle membrane degli endosomi e dei lisosomi, con espressione transiente sulla membrana cellulare.
• Altamente espresso nei monociti del sangue e nei macrofagi tissutali, è presente anche nei linfociti, fibroblasti, cellule endoteliali e in molte linee cellulari tumorali.
• Il suo dominio N-terminale di tipo mucina è pesantemente O-glicosilato, e la proteina contiene un singolo elice transmembrana e una breve coda citoplasmatica.
• Lo splicing alternativo produce diverse isoforme, e la proteina è classificata sotto parole chiave che includono peptide segnale, legame disolfuro e glicoproteina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dagli amminoacidi 100-200 del CD68 umano (NP_001242.2); si consiglia di eseguire un allineamento delle sequenze se la reattività crociata con altre specie è critica.
• Per il western blotting (WB), si noti che a causa della pesante glicosilazione, il peso molecolare osservato potrebbe essere significativamente superiore ai 37 kDa calcolati; validare con marcatori di peso molecolare appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), la permeabilizzazione è necessaria per accedere all'epitopo prevalentemente intracellulare.
• Le prestazioni ELISA dovrebbero essere ottimizzate titolando l'anticorpo con la proteina ricombinante rilevante o il lisato cellulare.
• Validare l'anticorpo nel proprio sistema di campioni specifico, poiché i livelli di espressione possono variare tra tessuti e linee cellulari.

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