Anticorpo Policlonale Anti-CD73/NT5E per WB, IHC-P ed ELISA - P21589

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD73/NT5E

• CD73/NT5E codifica per l'enzima ecto-5'-nucleotidasi, una proteina di membrana cellulare ancorata a glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che catalizza l'idrolisi dei nucleotidi monofosfati extracellulari, rilasciando fosfato inorganico e il corrispondente nucleoside.
• L'enzima idrolizza preferenzialmente l'AMP, ma accetta anche IMP, UMP, GMP, CMP, dAMP, dCMP, dTMP, NAD e NMN come substrati. Riferimenti correlati: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347
• CD73 mostra una preferenza per i monofosfati di ribonucleotidi rispetto alle loro forme equivalenti di deossiribosio. Riferimenti correlati: PMID:34403084
• La proteina è ancorata al foglietto esterno della membrana plasmatica tramite un'unità GPI e contiene legami disolfuro, siti di glicosilazione N-linked e un sito di legame per lo zinco essenziali per la sua integrità strutturale e attività catalitica.
• Lo splicing alternativo del gene NT5E produce multiple isoforme, che possono differire nelle loro proprietà enzimatiche o nella distribuzione subcellulare.
• La scheda UniProt elenca 'Variante di malattia' come parola chiave, suggerendo che mutazioni in NT5E possano essere associate a malattie umane.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 32-264), suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere il CD73 nativo sulla superficie cellulare in cellule e tessuti intatti.
• Per il Western blot, attendersi una banda vicino a 63 kDa; tuttavia, la glicosilazione N-linked può causare una migrazione a un peso molecolare apparente più alto; validare nel proprio sistema di campioni specifico.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare le condizioni di recupero dell'antigene e includere controlli positivi e negativi appropriati, specialmente in tessuti noti per esprimere CD73 come placenta, rene e organi linfoidi.
• È riportata reattività crociata con CD73 di topo e ratto; verificare le bande attese in quelle specie se si utilizzano campioni non umani.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere impiegato come reagente di cattura o di rilevamento; abbinarlo a un anticorpo monoclonale validato o a un altro lotto per l'ottimizzazione dell'ELISA sandwich.

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