Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CD73/NT5E per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P21589

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD73/NT5E

• CD73/NT5E codifica per l'ecto-5'-nucleotidasi, una proteina di membrana ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che catalizza l'idrolisi dei nucleotidi monofosfati extracellulari nei corrispondenti nucleosidi e fosfato inorganico.
• Catalizza l'idrolisi dell'AMP in adenosina e fosfato inorganico, con una preferenza per i monofosfati di ribonucleotidi rispetto alle forme desossiribosio (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347, PubMed:34403084). Riferimenti correlati:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• PMID:34403084
• Mostra un'ampia specificità di substrato, inclusi IMP, UMP, GMP, CMP, dAMP, dCMP, dTMP, NAD e NMN (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347). Riferimenti correlati:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• Localizzata sulla membrana cellulare tramite un ancoraggio GPI C-terminale, posizionando il sito attivo all'esterno della cellula per regolare la segnalazione purinergica e le risposte immunitarie.
• Richiede lo zinco come cofattore per l'attività catalitica; l'enzima contiene un centro di zinco binucleare essenziale per l'idrolisi del fosfato.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione N-legata e formazione di legami disolfuro, che contribuiscono alla stabilità e alla funzione della proteina.
• Le varianti genetiche in NT5E sono associate alla calcificazione arteriosa da deficit di CD73 (ACDC), una rara malattia autosomica recessiva.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 27–377 di NT5E umano, che coprono la maggior parte del dominio extracellulare; questo design favorisce il rilevamento di CD73 di superficie cellulare nella sua conformazione nativa.
• Per il Western blotting (WB), considerare un intervallo di diluizione di 1:500–1:2000, e tenere presente che il peso molecolare previsto è ~63 kDa; in condizioni riducenti, le forme glicosilate possono apparire leggermente più alte.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), la recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6.0) è spesso benefico; validare in un pannello di tessuti di controllo positivo e negativo.
• La reattività incrociata con topo e ratto è stata dimostrata, ma date le variazioni di sequenza specifiche della specie, le diluizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente per ogni saggio.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza da lotto a lotto può variare; si consiglia di titolare ogni nuovo lotto e di includere appropriati controlli positivi e negativi in ogni esperimento.
• Per l'ELISA, possono essere testati il rivestimento diretto della proteina ricombinante o formati di cattura-rilevamento; eseguire titolazioni a scacchiera per ottimizzare il rapporto segnale-rumore.

CamelBio: Il Vostro Ponte di Approvvigionamento Tutto-in-Uno

CamelBio supporta i produttori IVD e i laboratori di ricerca con una catena di approvvigionamento completa di materie prime di alta qualità, inclusi coppie di anticorpi validati, proteine ricombinanti e reagenti accessori. L'anticorpo policlonale CD73/NT5E si inserisce nei flussi di lavoro che indagano la segnalazione purinergica, il metabolismo dell'adenosina e la regolazione immunitaria. Che abbiate bisogno di grandi quantità, coniugazioni personalizzate o che stiate cercando di approvvigionarvi reagenti per target rari, contattate CamelBio per discutere di come possiamo semplificare il vostro approvvigionamento dal concetto alla clinica.