Anticorpo policlonale anti-CD84 da coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UIB8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD84

• Identità proteica e famiglia genica: CD84 (noto anche come SLAMF5, LY9B, hCD84, mCD84) è un membro della famiglia delle molecole di attivazione linfocitaria (SLAM), recettori della superfamiglia delle immunoglobuline coinvolti nella regolazione immunitaria. È codificato dal gene CD84 sul cromosoma 1 umano.
• Recettore autoligante e modulazione immunitaria: Come recettore autoligante, il CD84 modula l'attivazione e la differenziazione di varie cellule immunitarie attraverso interazioni omofile o eterofile. La sua attività è regolata dagli adattatori citoplasmatici SH2D1A/SAP e SH2D1B/EAT-2, collegandolo sia all'immunità innata che adattativa. Potenzia la citotossicità delle cellule NK, la proliferazione delle cellule T e le interazioni omofile aumentano la secrezione di IFNG e la stimolazione delle piastrine.
• Marcatore delle cellule progenitrici ematopoietiche: Il CD84 serve come marcatore per le cellule progenitrici ematopoietiche. Riferimenti correlati: PMID:11564780 PMID:12115647 PMID:12928397
• Funzione del centro germinativo e tolleranza delle cellule B: Il CD84 è necessario per un contatto prolungato tra cellule T e cellule B, per la funzione ottimale delle cellule T follicolari aiutanti e per la formazione del centro germinativo. Nei centri germinali, mantiene la tolleranza delle cellule B e aiuta a prevenire l'autoimmunità (Per similarità).
• Regolazione negativa nei mastociti: Nei mastociti, il CD84 regola negativamente la segnalazione del recettore delle immunoglobuline epsilon ad alta affinità, indipendentemente da SH2D1A e SH2D1B, ma coinvolgendo FES e PTPN6/SHP-1. Riferimenti correlati: PMID:22068234
• Regolazione positiva dell'autofagia nelle cellule dendritiche: Il CD84 regola positivamente la macroautofagia nelle cellule dendritiche primarie stabilizzando IRF8 e inibendo il suo degrado proteasomiale mediato da TRIM21. Riferimenti correlati: PMID:29434592
• Localizzazione subcellulare e distribuzione tissutale: Il CD84 è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo localizzata sulla membrana cellulare. È espresso prevalentemente nei tessuti ematopoietici, inclusi linfonodi, milza, leucociti periferici, macrofagi, cellule B, monociti, piastrine, timociti, cellule T e cellule dendritiche. Le cellule T della memoria mostrano un'espressione elevata.
• Modificazioni post-traduzionali e caratteristiche strutturali: Il CD84 è una glicoproteina con un peptide segnale, domini immunoglobulinici multipli e legami disolfuro conservati. È noto per essere fosforilato, come riflesso nelle parole chiave.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 22-225, corrispondenti al dominio extracellulare del CD84, rendendo questo anticorpo adatto per rilevare le forme superficiali e solubili in applicazioni come IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blot, considerare l'uso di condizioni riducenti e il caricamento di 20–30 µg di lisato cellulare da linee cellulari immunitarie umane (es. Jurkat, THP-1) per corsia; la banda prevista appare intorno a 39 kDa.
• Per l'immunofluorescenza, potrebbe essere richiesta la fissazione con paraformaldeide al 4% e la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1% per rilevare i pool intracellulari; validare con controlli appropriati.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento corrispondente può consentire lo sviluppo di un ELISA a sandwich per quantificare il CD84 solubile nel siero o nel supernatante di coltura; ottimizzare le concentrazioni di rivestimento.
• Come anticorpo policlonale, questo prodotto può presentare variabilità da lotto a lotto; si consiglia di validare ogni lotto nel proprio sistema sperimentale specifico.
• L'espressione del CD84 può essere modulata da stimoli immunitari; verificare i livelli di espressione del bersaglio nelle proprie condizioni sperimentali prima dell'uso.

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