Anticorpo monoclonale anti-CD8a per citometria a flusso - P01732

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CD8a

• La CD8a è una glicoproteina di superficie delle cellule T che funge da corecettore per le molecole di classe I del MHC, consentendo ai linfociti T citotossici di riconoscere ed eliminare cellule infette o tumorali.
• Esiste come eterodimero con CD8B o come omodimero ed è espressa sui timociti, sulle cellule T citotossiche, sulle cellule NK, sulle cellule T della memoria e sui linfociti intraepiteliali.
• La CD8a si lega simultaneamente al recettore delle cellule T (TCR) e alle proteine di classe I del MHC, reclutando la chinasi LCK per fosforilare i substrati di segnalazione per l'attivazione delle cellule T, la produzione di citochine e l'adesione.
• Nelle cellule NK, gli omodimeri CD8A supportano la sopravvivenza e l'uccisione seriale delle cellule bersaglio, mentre nei linfociti attivati promuovono la differenziazione in cellule T CD8+ della memoria.
• La proteina è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo, ma esiste una isoforma secreta; lo splicing alternativo genera trascritti multipli.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro, la N-glicosilazione e la palmitoilazione, che la ancorano ai raft lipidici.
• Specificità tissutale: espressa su un sottoinsieme di cellule immunitarie e up-regolata sulle cellule dendritiche plasmacitoidi dopo stimolazione con virus dell'herpes simplex-1.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 22–182) del CD8A umano, rendendo questo anticorpo adatto per rilevare la CD8a di superficie mediante citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, utilizzare protocolli standard di colorazione di superficie con anticorpo titolato in modo appropriato; considerare l'uso della discriminazione vivo/morto e dei controlli di isotipo appropriati.
• Convalidare la reattività in sistemi cellulari pertinenti come PBMC umani o linfociti di scimmia cinomolgo, poiché è indicata la reattività crociata.
• A seconda del disegno sperimentale, i passaggi di fissazione/permeabilizzazione possono essere ottimizzati se è richiesta la colorazione intracellulare.
• Per pannelli multiplex, verificare la compatibilità dei fluorofori e il potenziale impedimento sterico con altri marcatori nel complesso del corecettore CD8.

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