Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDC16 per IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13042

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDC16

• CDC16 (APC6) è una subunità centrale del complesso promotore dell'anafase/ciclosoma (APC/C), una ligasi E3 dell'ubiquitina multi-subunità essenziale per la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18485873
• APC/C media l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomica di regolatori chiave del ciclo cellulare, catalizzando principalmente catene poliubiquitiniche legate a 'Lys-11', e in misura minore catene legate a 'Lys-48' e 'Lys-63'. Può anche assemblare catene ramificate 'Lys-11'/'Lys-48' sui substrati. Riferimenti correlati: PMID:18485873, PMID:29033132
• L'attivazione di APC/C da parte di CDC20 in metafase innesca la degradazione della securina e della ciclina B, promuovendo la transizione all'anafase e l'uscita dalla mitosi. Riferimenti correlati: PMID:27120157, PMID:27509861
• L'attività di APC/C è inibita dal complesso del checkpoint mitotico (MCC) per garantire una corretta segregazione cromosomica finché tutti i cinetocori non sono adeguatamente attaccati. Riferimenti correlati: PMID:27509861
• CDC16 si localizza nel citoplasma, nei centrosomi e nel fuso mitotico durante la divisione cellulare, in linea con il suo ruolo nella regolazione mitotica.
• CDC16 appartiene a una famiglia di subunità di APC/C caratterizzate da domini di ripetizione tetratricopeptidica (TPR) che mediano le interazioni proteina-proteina.
• La proteina subisce fosforilazione, che può regolarne l'attività o le interazioni all'interno del complesso.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 200-300 di CDC16 umano. Questa sequenza interna può essere adatta per rilevare CDC16 a lunghezza intera in applicazioni di western blot, sebbene non inclusa nell'elenco standard delle applicazioni, considerare la validazione per l'analisi proteica denaturante dato il peso molecolare previsto di ~72 kDa.
• Per IHC-P, considerare l'uso della recupero antigenico indotto dal calore (es. buffer citrato, pH 6.0) e ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo primario.
• In IF/ICC, assicurare una corretta fissazione (es. paraformaldeide al 4%) e permeabilizzazione per consentire l'accesso a CDC16 citoplasmatico e centrosomiale.
• ELISA può essere utilizzato per quantificare CDC16; titolare l'anticorpo e validare la reattività incrociata con la specie target (umana, di topo, di ratto).

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