Anticorpo policlonale anti-CDC20 per WB, IF/ICC, ELISA - Q12834

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDC20

• CDC20 è un adattatore specifico per substrato e attivatore del complesso anafase-promuovente/ciclosoma (APC/C), che indirizza i substrati all'ubiquitinazione e alla degradazione. Riferimenti correlati: PMID:9734353 PMID:27030811 PMID:29343641

• È essenziale per la transizione metafase/anafase, indirizzando ciclina B e securina alla degradazione. Riferimenti correlati: PMID:27120157 PMID:27509861 PMID:32666501

• Riconosce i motivi della scatola di distruzione (D box), KEN box e ABBA sui substrati, guidando il riconoscimento specifico. Riferimenti correlati: PMID:29343641 PMID:27509861

• Componente del complesso del checkpoint mitotico (MCC), che inibisce APC/C finché i cromosomi non sono correttamente attaccati al fuso mitotico. Riferimenti correlati: PMID:27509861

• Il MCC include CDC20, MAD2L1, BUB1B e BUB3; ritarda la transizione metafase/anafase. Riferimenti correlati: PMID:9811605 PMID:9637688 PMID:27509861

• Quando il checkpoint del fuso viene silenziato, CDC20 viene auto-ubiquitinato nel MCC, riattivando APC/C per l'anafase. Riferimenti correlati: PMID:27509861

• Subcellolarmente, CDC20 si localizza nel citoplasma, nel centrosoma, nel cinetocore e nel polo del fuso durante la mitosi.

• CDC20 contiene ripetizioni WD ed è regolato da acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; le mutazioni sono associate a malattie.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 1–270) copre la regione N-terminale, che può essere coinvolta nel riconoscimento del substrato; l'anticorpo può riconoscere sia le forme native che quelle denaturate.
• Per Western blot, è prevista una banda vicino a 55 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cellule in mitosi per arricchire CDC20.
• Nell'immunofluorescenza, la colorazione dovrebbe essere osservata alle strutture mitotiche come cinetocori e poli del fuso; convalidare in cellule sincronizzate.
• La reattività incrociata con il topo permette studi in modelli murini; verificare la reattività nel vostro ceppo specifico se necessario.
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e la titolazione dell'anticorpo per il vostro formato di saggio.
• Come anticorpo policlonale, è possibile una variabilità lotto per lotto; includere controlli appropriati e considerare la purificazione per affinità se richiesta.

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