Anticorpo policlonale anti-CDC23 di coniglio per WB, IHC-P, ELISA - Q9UJX2

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDC23

• L'omologo della proteina 23 del ciclo di divisione cellulare (CDC23), designato anche subunità 8 del complesso promuovente l'anafase (APC8) o subunità 8 del ciclosoma, è un componente fondamentale del complesso promuovente l'anafase/ciclosoma (APC/C).
• L'APC/C è una ligasi E3 ubiquitina regolata dal ciclo cellulare che controlla la progressione attraverso la mitosi e la G1 mirando substrati chiave per la degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• CDC23 contribuisce all'ubiquitinazione mediata da APC/C, catalizzando principalmente la formazione di catene poliubiquitiniche legate a Lys-11 e, in misura minore, catene legate a Lys-48 e Lys-63, nonché catene ramificate Lys-11/Lys-48 sulle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:29033132
• Durante la transizione da metafase ad anafase, l'APC/C viene attivato da CDC20, portando all'ubiquitinazione e alla distruzione della ciclina B e della securina, essenziale per la segregazione cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:27120157 PMID:27509861
• L'attività dell'APC/C è regolata negativamente dal complesso del checkpoint mitotico (MCC), che si lega e inibisce l'APC/C per garantire un corretto attacco dei cromosomi prima dell'inizio dell'anafase. Riferimenti correlati: PMID:27509861
• CDC23 contiene motivi ripetuti tetratricopeptide (TPR) multipli che mediano interazioni proteina-proteina all'interno del complesso APC/C, e la proteina subisce modifiche post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione.
• Di CDC23 vengono prodotte multiple isoforme tramite splicing alternativo e la proteina è ampiamente espressa nei tessuti umani con un peso molecolare di circa 69 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre i residui 50–150 del CDC23 umano; verificare che l'anticorpo riconosca la isoforma bersaglio e confermare la specificità nel sistema modello utilizzato.
• Per il western blot (WB), è prevista una banda intorno a 69 kDa; includere appropriati controlli positivi e negativi (es. lisati di cellule sincronizzate per il ciclo cellulare).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo primario; sezioni tissutali con alti indici proliferativi possono produrre segnali più forti.
• Eseguendo l'ELISA, titolare l'anticorpo e abbinarlo a un sistema di rilevamento adatto; è stata riportata reattività crociata con CDC23 di topo e ratto, ma si consiglia la validazione batch-to-batch.
• Considerare di testare l'anticorpo sia in condizioni riducenti che non riducenti per valutare qualsiasi potenziale impatto sul riconoscimento dell'epitopo.

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